تفاوت بین میکروسکوپ فلورسانس و میکروسکوپ کانفوکال
میکروسکوپ فلورسانس
1. میکروسکوپ فلورسانس از نور ماوراء بنفش به عنوان منبع نور برای تابش شیء مورد بازرسی استفاده می کند و باعث می شود فلورسانس ساطع شود و سپس شکل و موقعیت شی را در زیر میکروسکوپ مشاهده کند. از میکروسکوپ فلورسانس برای مطالعه جذب ، حمل و نقل ، توزیع و بومی سازی مواد در سلول ها استفاده می شود. برخی از مواد موجود در سلول ها ، مانند کلروفیل ، می توانند در هنگام قرار گرفتن در معرض اشعه ماوراء بنفش ، فلورس شوند. همچنین برخی از مواد وجود دارد که نمی توانند خود فلورسانس را ساطع کنند ، اما در صورت رنگ آمیزی با رنگهای فلورسنت یا آنتی بادی های فلورسنت نیز می توانند فلورسانس را ساطع کنند و با نور ماوراء بنفش تابش شوند. میکروسکوپ فلورسانس یکی از ابزارهای تحقیق کیفی و کمی در مورد چنین موادی است.
2. اصل میکروسکوپ فلورسانس:
(الف) منبع نور: منبع نور نور از طول موج های مختلف (از ماوراء بنفش تا مادون قرمز) را منتشر می کند.
(ب) منبع نور فیلتر تحریک: انتقال نور از طول موج خاص که می تواند باعث فلورسانس در نمونه شود ، در حالی که نوری را مسدود می کند که برای فلورسانس هیجان انگیز بی فایده است.
ج) نمونه های فلورسنت: معمولاً با رنگدانه های فلورسنت رنگ آمیزی می شوند.
(د) مسدود کردن فیلتر: با مسدود کردن نور تحریک که توسط نمونه جذب نمی شود ، فلورسانس را به صورت انتخابی منتقل می کند و برخی از طول موج در فلورسانس نیز به صورت انتخابی منتقل می شوند. میکروسکوپ که از نور ماوراء بنفش به عنوان منبع نور استفاده می کند تا جسم روشن شده فلورسانس ساطع شود. میکروسکوپ الکترونی برای اولین بار توسط Knorr و Haruska در برلین ، آلمان در سال 1931 مونتاژ شد. این میکروسکوپ به جای تیرهای نوری از پرتوهای الکترونی با سرعت بالا استفاده می کند. با توجه به طول موج بسیار کوتاهتر جریان الکترون در مقایسه با امواج نوری ، بزرگنمایی میکروسکوپ الکترونی می تواند به 8 {3}} 0000 بار برسد ، با حداقل وضوح حداقل 0.2 نانومتر. میکروسکوپ الکترونی الکترونی اسکن ، که برای اولین بار در سال 1963 مورد استفاده قرار گرفت ، به افراد اجازه می دهد تا ساختارهای ریز و درشت را روی سطح اشیاء ببینند.
دامنه برنامه: برای بزرگنمایی تصاویر از اشیاء کوچک استفاده می شود. به طور کلی برای مشاهدات زیست شناسی ، دارو ، ذرات میکروسکوپی و غیره استفاده می شود.
میکروسکوپ کانفوکال
1. میکروسکوپ کانفوکال یک لنز نیمه بازتابنده را به مسیر نور منعکس شده اضافه می کند ، که نور منعکس شده ای را که از طریق لنزها در جهات دیگر عبور کرده است ، کاهش می دهد. در نقطه کانونی آن ، یک حفره با یک سوراخ سوراخ واقع در نقطه کانونی وجود دارد و در پشت بافل یک لوله فوتومولتیپیلر قرار دارد. می توان تصور کرد که نور منعکس شده قبل و بعد از آن نمی توان تمرکز نور را از طریق این سیستم کانفوکال بر روی سوراخ کوچک متمرکز کرد و توسط بافل مسدود می شود. بنابراین فوتومتر شدت نور منعکس شده را در نقطه کانونی اندازه گیری می کند.
2. اصل: میکروسکوپ های نوری سنتی از منابع نور فیلد استفاده می کنند و تصویر هر نقطه روی نمونه تحت تأثیر پراش یا نور پراکنده از نقاط همسایه است. میکروسکوپ کانفوکال اسکن لیزر از یک پرتو لیزر برای روشن کردن یک سوراخ سوراخ و تشکیل یک منبع نور نقطه برای اسکن هر نقطه در صفحه کانونی نمونه استفاده می کند. نقطه روشن شده روی نمونه در سوراخ تشخیص تصویربرداری می شود و پس از تشخیص سوراخ سوراخ ، توسط یک لوله فوتوموپیلر (PMT) یا یک دستگاه اتصال سرد (CCCD) به نقطه یا خط دریافت می شود و به سرعت یک تصویر فلورسانس را در صفحه مانیتور کامپیوتر تشکیل می دهد. سوراخ سوراخ و سوراخ تشخیصی نسبت به صفحه کانونی لنزهای هدف ترکیب می شود. نقاط موجود در هواپیمای کانونی به طور همزمان بر روی سوراخ روشنایی و سوراخ انتشار متمرکز شده اند و نقاط خارج از صفحه کانونی در سوراخ تشخیص تصویر نمی شوند. تصویر کانفوکال حاصل ، مقطع نوری نمونه است و بر ضرر تصاویر تاری در میکروسکوپ های عمومی غلبه می کند.
