تفاوت بین میکروسکوپ فلورسانس و میکروسکوپ معکوس چیست؟
میکروسکوپ ابزار مهمی در کشت سلولی و آزمایشات مشتقات مرتبط است. در حال حاضر انواع مختلفی از میکروسکوپ ها در بازار وجود دارد. انتخاب میکروسکوپی که نیازهای شما را برآورده کند و مناسب باشد، چالش برانگیز است. در ادامه به معرفی اصول میکروسکوپ معکوس و میکروسکوپ فلورسانس می پردازیم تا بتوانید به راحتی انتخاب کنید.
ترکیب یک میکروسکوپ معکوس مانند میکروسکوپ معمولی است و عمدتاً شامل سه بخش است: یک قسمت مکانیکی، یک بخش روشنایی و یک بخش نوری.
ترکیب یک میکروسکوپ معکوس مانند میکروسکوپ عمودی معمولی است، با این تفاوت که عدسی شیئی و سیستم روشنایی معکوس هستند، اولی زیر صحنه و دومی بالای صحنه است.
این ساختار باعث می شود که فاصله موثر بین سیستم متمرکز کننده روشنایی و صحنه به طور قابل توجهی گسترش یابد که برای قرار دادن اجسام ضخیم تر قابل مشاهده مانند پتری دیش ها و فلاسک های کشت سلولی مناسب است (البته اسلایدهای شیشه ای نیز قابل قبول هستند). لازم نیست فاصله کاری بین آنها خیلی زیاد باشد.
میکروسکوپ معکوس برای مشاهده میکروارگانیسم ها، سلول ها، باکتری ها، کشت بافت، سوسپانسیون ها، رسوبات و ... در واحدهای پزشکی و بهداشتی، دانشکده ها و دانشگاه ها و موسسات تحقیقاتی استفاده می شود. می تواند به طور مداوم روند تولید مثل و تقسیم سلول ها و باکتری ها را در محیط کشت مشاهده کند و می تواند از هر شکلی از این فرآیند عکس بگیرد.
به طور گسترده ای در سیتولوژی، انگل شناسی، انکولوژی، ایمونولوژی، مهندسی ژنتیک، میکروبیولوژی صنعتی، گیاه شناسی و سایر زمینه ها استفاده می شود.
میکروسکوپ فلورسانس برای مطالعه جذب، انتقال، توزیع و محلی سازی مواد شیمیایی در سلول ها استفاده می شود.
برای شیئی که باید بررسی شود، دو راه برای تولید فلورسانس وجود دارد: اتوفلورسانس، که فلورسانس را مستقیماً پس از تابش اشعه ماوراء بنفش منتشر می کند. فلورسانس ثانویه، که می تواند پس از اینکه جسم مورد مشاهده با رنگ های فلورسنت درمان می شود و سپس با نور ماوراء بنفش تابش می شود، فلورسانس منتشر می کند.
برخی از مواد موجود در سلول ها، مانند کلروفیل، پس از تابش اشعه ماوراء بنفش، اتوفلورسانس تولید می کنند. برخی از مواد به خودی خود نمی توانند فلورسانس شوند، اما اگر با رنگ های فلورسنت یا آنتی بادی های فلورسنت رنگ آمیزی شوند، می توانند پس از تابش اشعه ماوراء بنفش، فلورسانس ثانویه نیز منتشر کنند.
میکروسکوپ فلورسانس از یک منبع نور نقطهای با راندمان نوری بالا استفاده میکند و پس از تحریک مواد فلورسنت در نمونه، نوری با طول موج معین (نور فرابنفش 365 نانومتر یا نور آبی بنفش 420 نانومتر) را از طریق سیستم فیلتر رنگی به عنوان نور تحریک ساطع میکند. رنگ های مختلف فلورسانس، و سپس با بزرگنمایی شی و چشمی مشاهده کنید.
در زمینه کنتراست قوی، حتی اگر فلورسانس بسیار ضعیف باشد، به راحتی قابل تشخیص است و حساسیت بالایی دارد. این عمدتا برای مطالعه ساختار سلولی و عملکرد و ترکیب شیمیایی استفاده می شود.
