میکروسکوپ بیوفولورسانس قائم
اصل میکروسکوپ فلورسانس استفاده از یک منبع نور بسیار کارآمد (مانند لامپ جیوه جیوه با فشار فوق العاده بلند) برای انتشار طول موج خاصی از نور (مانند نور ماوراء بنفش 3650 λ یا نور آبی بنفش 4200 λ) از طریق یک سیستم فیلتر رنگی به عنوان نور تحریک ، که مواد فلورسنت موجود در نمونه های مختلف را به وجود می آورد تا رنگ های مختلف را نشان دهد. سپس ، توسط یک فیلتر مسدود کننده (یا سرکوب کننده) در پشت لنز عینی فیلتر می شود و از طریق اثر بزرگنمایی چشم مشاهده می شود.
فیلتر مسدود کننده دارای دو عملکرد است: در مرحله اول ، نور تحریک را از ورود به چشم به چشم خود جذب می کند تا از مداخله در فلورسانس و آسیب رساندن به چشم ها جلوگیری کند. مورد دوم انتخاب و اجازه عبور از فلورسانس خاص است و یک رنگ فلورسنت خاص را نشان می دهد.
میکروسکوپ های فلورسانس را می توان بر اساس اصل مسیر نور به دو نوع تقسیم کرد:
1. میکروسکوپ فلورسانس انتقال
میکروسکوپ های فلورسانس قدیمی با عبور از منبع نور تحریک از طریق ماده نمونه ، از یک کانون توجه برای تحریک فلورسانس استفاده می کنند. مزیت آن فلورسانس قوی در بزرگنمایی کم است ، اما ضرر آن این است که فلورسانس آن با افزایش بزرگنمایی کاهش می یابد. بنابراین فقط برای مشاهده مواد نمونه بزرگتر مناسب است.
2. میکروسکوپ فلورسانس در حال سقوط
نور تحریک از لنزهای عینی بر روی سطح نمونه پایین می آید و با استفاده از همان لنزهای عینی به عنوان کندانسور روشنایی و لنز عینی برای جمع آوری فلورسانس.
یک شکاف پرتوی رنگ دوگانه (آینه دوتایی) باید به مسیر نوری اضافه شود که زاویه 45 درجه با محور نوری تشکیل می دهد. چراغ تحریک در لنزهای عینی منعکس شده و روی نمونه متمرکز شده است. فلورسانس تولید شده توسط نمونه ، و همچنین چراغ تحریک منعکس شده از سطح لنزهای هدف و شیشه ای پوشش ، همزمان با لنز هدف وارد می شود و به شکاف پرتو دو رنگ باز می گردد تا نور تحریک و فلورسانس را جدا کند. سپس چراغ تحریک باقیمانده توسط جذب فیلتر مسدود می شود. اگر ترکیب های مختلف فیلترهای تحریک ، جداکننده های پرتو دو رنگ و از فیلترهای مسدود شده استفاده شود ، می توانند نیازهای محصولات مختلف واکنش فلورسنت را برآورده کنند.
مزایای این میکروسکوپ فلورسانس عبارتند از: روشنایی یکنواخت ، تصویربرداری شفاف و فلورسانس قوی تر با بزرگنمایی بزرگتر.
