دو روش مشاهده رایج کاربردی برای میکروسکوپ

دو روش مشاهده رایج کاربردی برای میکروسکوپ

1، مشاهده میدان تاریک

میدان دید تاریک در واقع روشنایی میدان تاریک است ویژگی‌های آن با میدان دید روشن متفاوت است، زیرا مستقیماً نور روشن‌کننده را مشاهده نمی‌کند، بلکه نور بازتابیده یا پراکنده شی مورد بازرسی را مشاهده می‌کند، بنابراین، میدان دید به یک پس‌زمینه تاریک تبدیل می‌شود، در حالی که جسم مورد بازرسی تصویر روشنی ارائه می‌دهد.

اصل میدان تاریک بر اساس پدیده نوری تیندال است که در آن ذرات گرد و غبار را نمی توان در معرض نور قوی به دلیل پراش ناشی از نور قوی مشاهده کرد، اگر نور به صورت مایل بر روی آن تابیده شود، به نظر می رسد که حجم ذرات به دلیل انعکاس نور افزایش می یابد و آنها را برای چشم انسان قابل مشاهده می کند.

لوازم جانبی ویژه مورد نیاز برای مشاهده میدان تاریک، نورافکن میدان تاریک است. ویژگی آن این است که اجازه نمی دهد پرتو نور از شیء از پایین به بالا عبور کند، اما مسیر نور را تغییر می دهد تا به صورت مایل به سمت جسم هدایت شود، به طوری که نور روشنایی مستقیماً وارد عدسی شیئی نمی شود و از تصویر روشن تشکیل شده از انعکاس یا سطح تفکیک بالای جسم در میدان تاریکی بیشتر استفاده می کند. از مشاهدات میدانی روشن که به 0.02-0.004 می رسد

2، روش بازرسی آینه کنتراست فاز

اختراع موفق میکروسکوپ کنتراست فاز در توسعه میکروسکوپ های نوری یک دستاورد مهم در فناوری میکروسکوپ مدرن است. ما می دانیم که چشم انسان فقط می تواند طول موج (رنگ) و دامنه (روشنایی) امواج نور را تشخیص دهد. برای نمونه های بیولوژیکی بی رنگ و شفاف، هنگام عبور نور، طول موج و دامنه تغییر چندانی نمی کند و مشاهده نمونه در میدان روشن را دشوار می کند.

میکروسکوپ کنتراست فاز از تفاوت طول مسیر نوری جسم مورد بازرسی برای بازرسی آینه ای استفاده می کند و به طور موثر از پدیده تداخل نور برای تبدیل اختلاف فازی که توسط چشم انسان قابل تشخیص نیست به یک اختلاف دامنه قابل تشخیص استفاده می کند. حتی مواد بی رنگ و شفاف نیز می توانند به وضوح قابل مشاهده باشند، این امر مشاهده سلول های زنده را بسیار تسهیل می کند، بنابراین میکروسکوپ کنتراست فاز به طور گسترده در میکروسکوپ های معکوس استفاده می شود.

اصل اساسی میکروسکوپ کنتراست فاز این است که اختلاف مسیر نوری نور مرئی عبوری از نمونه را به اختلاف دامنه تبدیل می کند، در نتیجه کنتراست بین ساختارهای مختلف را بهبود می بخشد و آنها را واضح و قابل مشاهده می کند پس از عبور از نمونه، نور تحت انکسار قرار می گیرد، از مسیر نوری اصلی منحرف می شود و 1/4 طول موج (λ) به تأخیر می افتد. اگر اختلاف مسیر نوری 1/4 λ دیگر کم یا زیاد شود، اختلاف مسیر نوری 1/2 λ می شود و تداخل بین دو پرتو نور پس از ترکیب محور افزایش یا کاهش می یابد و کنتراست را از نظر ساختار بهبود می بخشد، میکروسکوپ های کنتراست فاز دو تفاوت ویژه با میکروسکوپ های نوری معمولی دارند:

1. یک دیافراگم حلقوی بین منبع نور و کندانسور قرار دارد و وظیفه آن تشکیل یک مخروط توخالی از نور است که از کندانسور عبور کرده و بر روی نمونه متمرکز می شود.

2. صفحه فاز زاویه ای: یک صفحه فاز پوشش داده شده با فلوراید منیزیم به عدسی شیئی اضافه می شود که می تواند فاز نور مستقیم یا پراش شده را 1/4 λ به تاخیر بیندازد. می توان آن را به دو نوع تقسیم کرد:

(1). صفحه A+فاز: نور مستقیم را 1/4 λ به تأخیر بیندازید و پس از ترکیب محورها، دو مجموعه امواج نور را اضافه کنید. دامنه افزایش می‌یابد، و ساختار نمونه روشن‌تر از محیط اطراف می‌شود و کنتراست روشن (یا کنتراست منفی) ایجاد می‌کند.

(2). صفحه فاز B+: نور پراش شده را 1/4 λ به تأخیر بیندازید و پس از ترکیب محورهای دو مجموعه پرتوهای نور، امواج نور را کم کنید و در نتیجه دامنه کاهش یافته و کنتراست تاریک (یا کنتراست مثبت) ایجاد شود. ساختار تیره تر از محیط اطراف می شود