تفاوت میکروسکوپ دو فوتونی و میکروسکوپ کانفوکال لیزری
میکروسکوپ کانفوکال لیزری مجموعه ای از سیستم های مشاهده، تجزیه و تحلیل و خروجی است که از لیزر به عنوان منبع نور، اصل فوکوس مزدوج و دستگاه بر اساس میکروسکوپ نوری سنتی و پردازش تصویر دیجیتال شی مشاهده شده با استفاده از رایانه استفاده می کند. سیستمهای اصلی شامل منابع نور لیزر، میکروسکوپهای خودکار، ماژولهای اسکن (شامل کانالهای مسیر نوری هم کانونی و سوراخها، آینههای اسکن، آشکارسازها)، پردازندههای سیگنال دیجیتال، رایانهها، و دستگاههای خروجی تصویر (نمایشگر، چاپگرهای رنگی) هستند. با استفاده از میکروسکوپ کانفوکال اسکن لیزری امکان انجام توموگرافی و تصویربرداری از نمونه مشاهده شده وجود دارد. بنابراین می توان ساختار فضایی سه بعدی سلول ها را بدون آسیب مشاهده و تحلیل کرد.
در عین حال، میکروسکوپ کانفوکال اسکن لیزری نیز ابزار قدرتمندی برای مشاهده دینامیک سلولهای زنده، برچسبگذاری چندگانه ایمونوفلورسانس و برچسبگذاری فلورسانس یونی است. این به طور دقیق ماهیت طیف را تجزیه و تحلیل می کند و سیگنال ها را از برچسب های مختلف با طیف های گسیلی بسیار همپوشانی متمایز می کند.
مهمترین چیز این است که برای رنگ آمیزی فلورسانس چند رنگ، می تواند تأثیر تداخل فلورسانس را کاملاً از بین ببرد و در عین حال از دست دادن سیگنال فلورسانس نمونه را به حداقل برساند. اینها همه چیزهایی هستند که آینه های معمولی نمی توانند به آنها دست پیدا کنند.
رابطه فاصله کانونی بین شی میکروسکوپ و چشمی
اصول مختلف
1. میکروسکوپ فلورسانس: از نور ماوراء بنفش به عنوان منبع نور برای روشن کردن جسم مورد آزمایش استفاده می کند و باعث می شود که فلورسانس ساطع کند و سپس شکل و موقعیت جسم را زیر میکروسکوپ مشاهده می کند.
2. میکروسکوپ کانفوکال لیزری: بر اساس تصویربرداری میکروسکوپ فلورسانس، یک دستگاه اسکن لیزری برای تحریک پروب های فلورسانس با استفاده از اشعه ماوراء بنفش یا نور مرئی نصب می شود.
ویژگی های مختلف
1. میکروسکوپ فلورسانس: برای مطالعه جذب، انتقال، توزیع و محلی سازی مواد در سلول ها استفاده می شود. برخی از مواد موجود در سلول ها، مانند کلروفیل، پس از قرار گرفتن در معرض اشعه ماوراء بنفش می توانند فلورسانس منتشر کنند. برخی از مواد ممکن است خود فلورسانس ساطع نکنند، اما اگر با رنگ های فلورسنت یا آنتی بادی های فلورسنت رنگ شوند، می توانند تحت اشعه ماوراء بنفش نیز فلورسانس منتشر کنند.
2. میکروسکوپ کانفوکال لیزری: استفاده از رایانه برای پردازش تصویر برای به دست آوردن تصاویر فلورسنت از ریزساختار داخلی سلول ها یا بافت ها و مشاهده سیگنال های فیزیولوژیکی مانند Ca{1}}، مقدار pH، پتانسیل غشاء و تغییرات در مورفولوژی سلول. در سطح زیر سلولی
