روش روشنایی دارکفیلد برای مشاهده ذرات با میکروسکوپ

روش روشنایی دارکفیلد برای مشاهده ذرات با میکروسکوپ

1. نورپردازی شفاف
میکروسکوپ های بیولوژیکی اغلب برای مشاهده نمونه های شفاف استفاده می شوند و نیاز به روشنایی با نور عبوری دارند. دو نوع روش نورپردازی وجود دارد

(1) منبع نور بحرانی روشنایی بر روی صفحه جسم پس از عبور از یک لنز کندانسور تصویر می شود، همانطور که در شکل 5 نشان داده شده است. اگر اتلاف انرژی نور نادیده گرفته شود، روشنایی تصویر منبع نور مانند خود منبع نور است. بنابراین، این روش معادل قرار دادن منبع نور در صفحه جسم است. بدیهی است که در روشنایی بحرانی، اگر روشنایی سطح منبع نور ناهموار باشد یا ساختارهای کوچک آشکاری مانند فیلامنت ها را نشان دهد، اثر مشاهدات میکروسکوپی را به طور جدی تحت تاثیر قرار می دهد که این نقطه ضعف روشنایی بحرانی است. راه حل این است که فیلترهای رنگی سفید مایل به شیری و جاذب گرما را در مقابل منبع نور قرار دهید تا نور یکنواخت تر شود و از قرار گرفتن طولانی مدت در معرض منبع نور که ممکن است به جسم مورد بازرسی آسیب برساند، جلوگیری شود. هنگامی که با نور عبوری روشن می شود، زاویه دیافراگم پرتو تصویربرداری عدسی شیئی توسط زاویه دیافراگم پرتو مربع آینه متمرکز تعیین می شود. برای استفاده کامل از دیافراگم عددی لنز شیئی، لنز فوکوس باید دیافراگم عددی یکسان یا کمی بزرگتر با لنز شیئی داشته باشد.

(2) مضرات روشنایی سطح ناهموار در روشنایی بحرانی روشنایی کولا را می توان در روشنایی کولا از بین برد. همانطور که در شکل 6 نشان داده شده است، یک نورافکن کمکی 2 بین منبع نور 1 و نورافکن 5 اضافه کنید. می توان مشاهده کرد که از آنجایی که عدسی خازنی کمکی 2 (همچنین به عنوان کولندر شناخته می شود) که به طور یکنواخت توسط منبع نور روشن می شود، مستقیماً برای تصویربرداری از نمونه 6 استفاده نمی شود، میدان دید (نمونه) به طور یکنواخت درخشنده شیئی است.

2. نور در حال سقوط
هنگام مشاهده اجسام مات، مانند صفحات سنگ زنی فلز از طریق میکروسکوپ متالوگرافی، نور اغلب از کنار یا بالا اعمال می شود. در این مرحله، هیچ پوشش شیشه ای روی سطح شی مشاهده شده وجود ندارد و شکل گیری تصویر نمونه به نور بازتاب شده یا پراکنده ای که وارد عدسی شیئی می شود، متکی است. همانطور که در شکل 7 نشان داده شده است.

3. روش روشنایی برای مشاهده ذرات با استفاده از میدان دید تاریک
از روش میدان تاریک می توان برای مشاهده ذرات بسیار ریز استفاده کرد. ذرات بسیار ریز نامیده می‌شوند به آن ذرات ریز که کوچک‌تر از حد تفکیک میکروسکوپ هستند. اصل روشنایی میدان تاریک برای جلوگیری از ورود نور اصلی به عدسی شیئی است و فقط نور پراکنده شده توسط ذرات می تواند برای تصویربرداری وارد عدسی شیئی شود. بنابراین، تصویر ذرات روشن در پس زمینه تیره داده می شود و با وجود اینکه میدان دید پس زمینه تیره است، کنتراست خوب است که می تواند وضوح را بهبود بخشد.