مزایای میکروسکوپ چند فوتونی اسکن لیزری افزایش یافته است

مزایای میکروسکوپ چند فوتونی اسکن لیزری افزایش یافته است

میکروسکوپ مولتی فوتونی اسکن لیزری یک پیشرفت قابل توجه در میکروسکوپ نوری است که عمدتاً در توانایی مشاهده ساختارهای عمیق سلول های زنده، سلول های ثابت و بافت ها و به دست آوردن ساختارهای صفحه چند لایه Z شفاف و واضح، یعنی برش های نوری آشکار می شود. برای ساخت ساختارهای جامد سه بعدی از نمونه ها استفاده شود. میکروسکوپ کانفوکال از یک منبع نور لیزری استفاده می کند که منبسط می شود تا کل صفحه کانونی عدسی شیئی را پر کند و سپس از طریق سیستم عدسی عدسی شیئی به نقاط بسیار کوچکی در صفحه کانونی نمونه همگرا می شود. با توجه به دیافراگم عددی عدسی شیئی، قطر نقطه روشنایی در حدود 0.25-0.8 میکرومتر و عمق آن حدود 0 است.{{7} }.5 میکرومتر. اندازه نقطه کانونی با طراحی میکروسکوپ، طول موج لیزر، ویژگی های هدف، تنظیمات حالت واحد اسکن و ویژگی های نمونه تعیین می شود. محدوده روشنایی و عمق یک میکروسکوپ میدانی زیاد است، در حالی که نور یک میکروسکوپ کانفوکال روی یک نقطه کانونی در صفحه کانونی متمرکز است. مزیت اصلی میکروسکوپ کانفوکال این است که می‌تواند برش‌های نوری ظریفی را بر روی نمونه‌های فلورسنت ضخیم (حداکثر 50 میکرومتر یا بیشتر) با ضخامت تقریباً 0.5 تا 1.5 میکرومتر انجام دهد. مجموعه ای از تصاویر برش نوری را می توان با حرکت دادن نمونه به بالا و پایین با استفاده از موتور پله ای محور Z میکروسکوپ به دست آورد. مجموعه اطلاعات تصویر در صفحه * * بدون تداخل سیگنال های ساطع شده از موقعیت های دیگر روی نمونه کنترل می شود. پس از حذف تأثیر فلورسانس پس‌زمینه و افزایش نسبت سیگنال به نویز، کنتراست و وضوح تصاویر هم کانونی به طور قابل‌توجهی در مقایسه با تصاویر فلورسانس با نور میدان سنتی بهبود یافته است. در بسیاری از نمونه‌ها، اجزای ساختاری پیچیده در هم تنیده می‌شوند تا سیستم‌های پیچیده را تشکیل دهند، اما زمانی که بتوان بخش‌های نوری کافی را جمع‌آوری کرد، می‌توانیم از نرم‌افزار برای بازسازی آنها در سه بعدی استفاده کنیم. این روش تجربی به طور گسترده در تحقیقات بیولوژیکی برای روشن کردن روابط پیچیده ساختاری و عملکردی بین سلول ها یا بافت ها استفاده شده است.