مقدمه ای بر اصول میکروسکوپ فلورسانس
1، میکروسکوپ فلورسانس استفاده از نور ماوراء بنفش به عنوان منبع نور است که برای تابش جسم مورد بررسی استفاده می شود، به طوری که فلورسانس ساطع می کند و سپس شکل جسم و محل آن را در زیر میکروسکوپ مشاهده می کند. میکروسکوپ فلورسانس برای مطالعه جذب و انتقال مواد در سلول، توزیع و محلی سازی مواد شیمیایی و غیره استفاده می شود. برخی از مواد در سلول مانند کلروفیل را می توان در سلول یافت. برخی از مواد موجود در سلول، مانند کلروفیل، می توانند پس از تابش نور فرابنفش فلورسانس شوند. برخی از مواد هستند که به خودی خود نمی توانند فلورسانس شوند، اما اگر با رنگ های فلورسنت یا آنتی بادی های فلورسنت رنگ آمیزی شوند، پس از تابش اشعه ماوراء بنفش نیز می توانند فلورسانس شوند و میکروسکوپ فلورسانس یکی از ابزارهای انجام تحقیقات کمی و کیفی این مواد است.
2، اصل میکروسکوپ فلورسانس:
(الف) منبع نور: منبع نور طول موج های مختلف نور (در فرابنفش تا مادون قرمز) را ساطع می کند.
(ب) منبع فیلتر تحریک: از طریق نمونه می تواند فلورسانس با طول موج خاصی از نور تولید کند، در حالی که مانع تحریک نور فلورسانس بی فایده می شود.
(C) نمونه فلورسنت: عموماً با یک فلوروکروم رنگ آمیزی می شود.
(د) فیلترهای مسدود کننده: نور تحریکی را که برای انتقال انتخابی فلورسانس توسط نمونه جذب نمی شود، مسدود می کند و برخی از طول موج های فلورسانس نیز به صورت انتخابی منتقل می شوند.
میکروسکوپی که از نور ماوراء بنفش به عنوان منبع نور برای فلورسانس کردن جسم تحت تابش استفاده می کند. میکروسکوپ الکترونی اولین بار در سال 1931 در برلین آلمان توسط Knorr و Haroska مونتاژ شد. این میکروسکوپ به جای پرتو نور از پرتو الکترونی پرسرعت استفاده می کند. از آنجایی که طول موج جریان الکترونی بسیار کوتاهتر از موج نور است، بنابراین بزرگنمایی میکروسکوپ الکترونی می تواند به 800،000 برابر، حداقل حد تفکیک 0.2 نانومتر برسد. 1963 شروع به استفاده از میکروسکوپ الکترونی روبشی می کند که مردم سطح ساختار کوچک جسم را ببینند.
3، دامنه کاربرد: برای بزرگنمایی تصویر اجسام کوچک استفاده می شود. به طور کلی در زیست شناسی، پزشکی، ذرات میکروسکوپی و مشاهدات دیگر استفاده می شود.
