(تفاوت بین میکروسکوپ های فلورسانس (دو فوتونی، هم کانونی) و میکروسکوپ های معمولی
میکروسکوپ فلورسانس استفاده از نور فرابنفش به عنوان منبع نور است که برای تابش جسم مورد بررسی استفاده می شود، به طوری که جسم منبع نوری را ساطع می کند و سپس مشاهده جسم زیر میکروسکوپ انجام می شود. عمدتاً برای سلول های ایمونوفلورسانس استفاده می شود که عمدتاً از منبع نور، سیستم صفحه فیلتر و سیستم نوری برای مشاهده تصویر فلورسانس نمونه ها از طریق بزرگنمایی چشمی و عدسی شیئی تشکیل شده است. بیایید به میکروسکوپ فلورسانس نگاه کنیم و میکروسکوپ نوری معمولی چه نوع تفاوتی دارد.
1، در حالت روشنایی
نور میکروسکوپ فلورسانس به طور کلی با نوع سقوط است، یعنی منبع نور از طریق عدسی شیئی برای قرار دادن روی نمونه آزمایشی است.
2، در قطعنامه
میکروسکوپ فلورسانس از نور ماوراء بنفش به عنوان منبع نور استفاده می کند، طول موج نسبتا کوتاه است، اما وضوح بالاتر از میکروسکوپ نوری معمولی است.
3، تفاوت در فیلتر
میکروسکوپ فلورسانس استفاده از دو فیلتر مخصوص است که در جلوی منبع نور برای فیلتر کردن نور مرئی، بین عدسی شیئی و چشمی برای فیلتر کردن نور ماوراء بنفش استفاده می شود که می تواند از چشم انسان محافظت کند.
میکروسکوپ فلورسانس نیز متعلق به نوعی از میکروسکوپ نوری است، به طور عمده طول موج تحریک میکروسکوپ فلورسانس کوتاه است، بنابراین این منجر به میکروسکوپ فلورسانس و میکروسکوپ معمولی ساختار متفرقه ساخت و استفاده از میکروسکوپ های مختلف، میکروسکوپ فلورسانس اکثراً ضبط خوبی از عملکرد نور ضعیف دارند، بنابراین در فلورسانس بسیار ضعیف، توانایی تصویربرداری و خوب است. همراه با بهبود مستمر میکروسکوپ فلورسانس در سال های اخیر، نویز نیز تا حد زیادی کاهش یافته است. بنابراین، میکروسکوپ های فلورسانس بیشتر و بیشتر مورد استفاده قرار می گیرند.
میکروسکوپ فلورسانس دو فوتونی دارای مزایای بسیاری است:
(1) طول موجهای بلندتر نور کمتر تحت تأثیر پراکندگی قرار میگیرند تا اینکه طولموجهای کوتاهتر نور به راحتی به نمونه نفوذ میکنند.
(2) مولکول های فلورسنت خارج از صفحه کانونی برانگیخته نمی شوند تا نور تحریک بیشتری بتواند به صفحه کانونی برسد، به طوری که نور تحریک بتواند به عمق نمونه نفوذ کند.
3) طول موجهای طولانیتر نور نزدیک به مادون قرمز نسبت به طولموجهای کوتاهتر برای سلولها سمیت کمتری دارند.
4) هنگام استفاده از میکروسکوپ دو فوتونی برای مشاهده یک نمونه، نور سفید و سمیت نوری فقط در سطح کانونی وجود دارد. بنابراین، میکروسکوپهای دو فوتونی برای مشاهده نمونههای ضخیم، برای مشاهده سلولهای زنده یا برای انجام آزمایشهای فوتوبلیچینگ نقطهای مناسبتر از میکروسکوپهای تک فوتونی هستند.
