تعیین تعداد میکروارگانیسم ها - روش شمارش مستقیم میکروسکوپی!
اساسی
روش شمارش مستقیم میکروسکوپی روشی ساده، سریع و شهودی برای قرار دادن مقدار کمی از سوسپانسیون نمونه مورد آزمایش بر روی یک لام شیشه ای مخصوص (همچنین به عنوان شمارشگر باکتری) با مساحت و حجم معین و شمارش مستقیم در زیر است. یک میکروسکوپ در حال حاضر، شمارشگرهای باکتریایی رایج در داخل و خارج از کشور عبارتند از: تخته شمارش سلول های خون، شمارشگر باکتری پیتروف هاوزر و شمارشگر باکتری هاکسلی و غیره. اصول اولیه یکسان است. دو عدد شمارنده باکتری آخری دارای حجم کل 0 هستند.02 میلی متر مکعب پس از پوشاندن با شیشه روکش، و فاصله بین شیشه روکش و لام فقط 0.02 میلی متر است، بنابراین سلول های کوچک مانند باکتری ها را می توان با یک لنز شیئی غوطه ور در روغن مشاهده و شمارش کرد. علاوه بر استفاده از این شمارنده های باکتری، یک روش تخمینی نیز وجود دارد که می تواند مستقیماً نسبت ناحیه اسمیر به ناحیه میدان بینایی را در زیر میکروسکوپ مشاهده کند. این روش عموماً برای بررسی باکتریولوژیکی شیر استفاده می شود. مزیت روش شمارش مستقیم میکروسکوپ این است که بصری، سریع و آسان برای کار است. اما عیب این روش این است که نتایج اندازه گیری شده معمولاً مجموع باکتری های مرده و زنده است. در حال حاضر روش هایی برای غلبه بر این نقیصه وجود دارد، مانند ترکیب باکتری های زنده، رنگ آمیزی کشت ریز محفظه ای (در زمان کوتاه) و افزودن بازدارنده های تقسیم سلولی برای دستیابی به هدف شمارش تنها باکتری های زنده.
در این آزمایش از هموسیتومتر به عنوان نمونه برای انجام شمارش مستقیم زیر میکروسکوپ استفاده شد. برای روش های استفاده از دو شمارنده باکتری دیگر، لطفاً به دستورالعمل های هر سازنده مراجعه کنید. شمارش مستقیم زیر میکروسکوپ با هموسیتومتر یک روش رایج شمارش میکروبی است. تخته شمارش یک اسلاید شیشه ای مخصوص ساخته شده است که روی آن چهار شیار سه سکو را تشکیل می دهند. سکوی گسترده تر در وسط توسط یک شکاف افقی کوتاه به دو نیمه تقسیم می شود و هر طرف سکو با یک شبکه پوشانده شده است. هر شبکه به 9 مربع بزرگ تقسیم می شود و مربع بزرگ وسط اتاق شمارش است. مقیاس اتاق شمارش به طور کلی دارای دو مشخصه است، یکی اینکه یک مربع بزرگ به 25 مربع میانی و هر مربع میانی به 16 مربع کوچک تقسیم می شود. دیگری این است که یک مربع بزرگ به 16 مربع وسط و هر مربع وسط به 25 مربع کوچک تقسیم می شود، اما مهم نیست که چه نوع صفحه شماری، 400 مربع کوچک در آن وجود دارد. هر مربع بزرگ طول ضلع هر مربع بزرگ 1 میلی متر است و سپس مساحت هر مربع بزرگ 1 میلی متر مربع است. محفظه شمارش 0.1 میلی متر (یک ده هزارم میلی لیتر) است.
