نمونه مورد نیاز برای میکروسکوپ نوری چیست؟
در فرآیند آماده سازی نمونه میکروسکوپ نوری، ضخامت برش نمونه بین 2 تا 25 میلی متر است. ضخامت برش میکروسکوپ الکترونی در عرض 50-100 نانومتر است (به جز میکروسکوپ الکترونی با ولتاژ بالا، ضخامت نمونه میتواند به ۱ میلیمتر برسد)، بنابراین روش برش مورد استفاده همه یکسان نیست.
از نظر حامل، حامل بخش میکروسکوپ نوری یک لام شیشه ای است و حامل بخش میکروسکوپ الکترونی شبکه حامل است.
از نظر تثبیت، مقاطع میکروسکوپ نوری با فیکساتور مرکب ثابت می شوند، در حالی که مقاطع میکروسکوپ الکترونی به طور مکرر با یک فیکساتور منفرد ثابت می شوند.
از نظر رنگآمیزی، رنگآمیزی نمونههای نوری نسبتاً ساده است. با توجه به نمونههای مشاهدهای مختلف و نوع میکروسکوپ نوری، معمولاً استفاده از لکههای ثابت کافی است. روش های زیادی برای رنگ آمیزی مجدد نمونه های میکروسکوپ الکترونی وجود دارد و همچنین بسیار پیچیده هستند، مانند رنگ آمیزی منفی، رنگ آمیزی نقره و غیره.
از نظر تعبیه، پارافین، کلودیون، ژلاتین و غیره به عنوان عوامل تعبیه کننده برای مقاطع میکروسکوپ نوری استفاده می شود. رزین اپوکسی، رزین پلی استایرن، رزین ایزوبوتیلن و رزین محلول در آب به عنوان مواد جاسازی برای مقاطع میکروسکوپ الکترونی استفاده می شود.
برای اینکه میدان دید میکروسکوپ نور یکنواخت و کافی دریافت کند، لازم است سیستم مسیر نوری روشنایی را در اولین نصب میکروسکوپ و رفع اشکال تنظیم کنید. الزامات. علاوه بر این، درک صحیح تنظیم سیستم مسیر نوری روشنایی یک مرحله ضروری پس از تعویض لامپ در فرآیند استفاده از میکروسکوپ است و همچنین ابزاری ضروری برای آزمایش عملکرد میکروسکوپ هر از گاهی در فرآیند استفاده روزانه تنظیم سیستم مسیر نوری نور میکروسکوپ عمدتاً شامل 4 مورد زیر است: 1. تنظیم مقدماتی محفظه لامپ منبع روشنایی در خارج از میکروسکوپ ① ابتدا پوسته محفظه لامپ را باز کنید و با فشار دادن لامپ هالوژن را در سوکت قرار دهید. کلیپ بهار کثیفی مانند اثر انگشت بر روی لامپ بر عمر لامپ تأثیر می گذارد. ②اتاق لامپ را روی میز قرار دهید، پس از روشن کردن برق، از یک پیچ گوشتی مخصوص برای تنظیم سوراخ دستگیره فوکوس لامپ (با علامت "←→") استفاده کنید، به طوری که رشته بر روی دیوار پخش شود 1-2 متر دورتر، و تصویر رشته تنظیم می شود. سپس ارتفاع لامپ را برای تنظیم سوراخ رشته (که با "──" مشخص شده است) تنظیم کنید تا موقعیت رشته مناسب باشد. سپس سوراخهای پیچ تنظیم موقعیت چپ و راست لامپ (که با "──" مشخص شده است) را تنظیم کنید تا موقعیت چپ و راست رشته مناسب باشد.
2. هدف از بازرسی و تصحیح موقعیت روشنگر منبع نور (رشته) در میکروسکوپ تنظیم انتهای تصویر روشنگر در میدان دید عدسی شیئی و اطمینان از اینکه میدان دید میکروسکوپ به طور کامل و یکنواخت از منظر منبع نور دریافت می شود. نورپردازی که پیش نیاز تنظیم سیستم روشنایی کولر است. ابزار اولیه مورد نیاز: تلسکوپ های مرکزی مجهز به خرید میکروسکوپ هستند. ① آستین شیشه مات را در خانه لامپ جدا کنید و خانه لامپ را دوباره روی میکروسکوپ قرار دهید ② یک لنز شیئی 10× انتخاب کنید، برنامه منبع نور را روشن کنید تا نمونه را پیدا کنید و فوکوس را به وضوح تنظیم کنید، و سپس از یک شیئی 40× استفاده کنید. لنز برای فوکوس کردن نمونه به وضوح (عدسی شیئی 40× کل تصویر رشته را می توان به وضوح مشاهده کرد). ③ دیافراگم دیافراگم و دیافراگم میدان کندانسور را به حداکثر باز کنید. ④ یکی از چشمی ها را از برق بکشید، آن را با یک تلسکوپ مرکزی جایگزین کنید، قسمت سفید را بگیرید و چشمی سیاه را با دست دیگر گسترش دهید، تصویر رشته ای را می توان در میدان دید مشاهده کرد. ⑤اگر موقعیت فیلامنت مناسب نیست، سوراخ "──" را تنظیم کنید، تصویر رشته را در جهت افقی تنظیم کنید، سوراخ "──" را تنظیم کنید، و تصویر رشته را در جهت عمودی تنظیم کنید تا تصویر رشته را به صورت دایره ای تنظیم کنید. تصویری که فقط دیافراگم لنز شیئی را پر می کند. ⑥ پس از تنظیم، آستین شیشه مات را به موقعیت اصلی خود برگردانید، تلسکوپ مرکزی را از برق بکشید و برای تنظیم بعدی چشمی را جایگزین کنید. تنظیم فوق الذکر اتاق لامپ منبع نور روشنایی در خارج از میکروسکوپ و کالیبره کردن موقعیت روشنگر منبع نور در داخل میکروسکوپ فقط باید زمانی انجام شود که میکروسکوپ برای اولین بار نصب و اشکال زدایی شود و لامپ جایگزین شده است. در صورت گیج شدن می توانید طبق مراحل بالا آن را به حالت اولیه بازگردانید.
3. تنظیم صحیح سیستم روشنایی کوهلر (کوهلر) تنظیم صحیح میکروسکوپ، یکی از وظایف اصلی تنظیم سیستم مسیر نور روشنایی است و کلید تنظیم سیستم روشنایی کوهلر است. برای همه کسانی که از میکروسکوپ استفاده می کنند، به ویژه کسانی که میکروسکوپ می گیرند، باید درک و تسلط خاصی بر اصول سیستم روشنایی کوهلر و مراحل تنظیم آن داشته باشند تا بتوانند عملکرد میکروسکوپ را کامل کنند. عکسهای بهدستآمده میتوانند از نظر اثر سازگارتر و کاملتر باشند. اصل سیستم روشنایی کولر به سادگی این است: نور ساطع شده از هر نقطه از روشنگر منبع نور می تواند میدان دید میکروسکوپ را روشن کند و نور ساطع شده از هر نقطه از روشن کننده منبع نور جمع آوری می شود و در میدان دید میکروسکوپ روشنایی بسیار کافی و یکنواخت به دست می آید. هدف از تنظیم سیستم روشنایی کوهلر، به دست آوردن روشنایی یکنواخت و کافی برای میدان دید مشاهده شده و جلوگیری از تأثیر نور سرگردان یا تداخل با سیستم تصویربرداری است تا از ایجاد مه بر روی نگاتیو در هنگام عکاسی جلوگیری شود. اجزای اساسی یک سیستم روشنایی کولر با تنظیم بالا: دیافراگم میدانی، سیستم کندانسور با تنظیم روی محور. ① 10× لنز شیئی و چشمی 10× را انتخاب کنید ② عدسی جلوی کندانسور را در مسیر نوری قرار دهید، دیافراگم دیافراگم را در یک موقعیت متوسط (نه خیلی بزرگ یا نه خیلی کوچک) تنظیم کنید، سپس کندانسور را بالا بیاورید. در موقعیت بالا قرار دهید، و صفحه گردان خازن را در موقعیت "J" میدان روشن تنظیم کنید ③ دیافراگم میدان را به حداقل (0.1) تنظیم کنید.
④ نمونه بیولوژیکی مهر و موم شده را روی صحنه قرار دهید، منبع نور را روشن کنید و به وضوح تمرکز کنید
⑤ یک ناحیه روشن محلی یا نقطه روشن در میدان دید ظاهر می شود، که تصویری تار از دیافراگم میدان است که در آن جزئیات نمونه به وضوح قابل مشاهده است. جزئیات نمونه را به وضوح ببینید
⑥ کندانسور را کمی پایین بیاورید، به طوری که نقطه روشن در میدان دید به تدریج باریک شود و به تدریج به یک تصویر چند ضلعی شفاف تبدیل شود، که تصویر واضح دیافراگم میدان است.
⑦ در شرایط عادی، تصویر چند ضلعی در مرکز میدان دید قرار ندارد. برای تنظیم تصویر چند ضلعی میدان دید در موقعیت مرکزی، لازم است یک جفت پیچ مرکزی کندانسور را تنظیم کنید.
⑧ به تدریج دیافراگم میدان دید را باز کنید تا تصویر چند ضلعی به چند ضلعی میدان دید تبدیل شود و شرایط تراز را بیشتر بررسی کنید. اگر تراز ایده آل نیست، به تنظیم کمی پیچ تراز ادامه دهید.
⑨ دیافراگم میدان را کمی باز کنید تا تصویر چند ضلعی در لبه میدان دید محو شود. در این مرحله، تنظیم سیستم روشنایی Kühler به پایان می رسد. پس از تنظیم سیستم روشنایی Kühler، کل میدان دید به طور یکنواخت روشن شد و میکروگراف ها روشن و واضح با کنتراست معمولی بودند.
