آیا تا به حال اصول اولیه میکروسکوپ کنتراست فاز را درک کرده اید؟
میکروسکوپ کنتراست فاز توسط دانشمند هلندی زرنیک در سال 1935 برای مشاهده نمونه های رنگ نشده اختراع شد. برای سلول های زنده و نمونه های بیولوژیکی رنگ نشده، به دلیل تفاوت ضریب شکست و ضخامت ریزساختار هر قسمت از سلول، هنگام عبور موج نور، طول موج و دامنه تغییر نمی کند، فقط فاز تغییر می کند (اختلاف دامنه). ) که با چشم انسان نامرئی است. رعایت کنید. میکروسکوپ کنتراست فاز اختلاف فاز را تغییر می‌دهد و از پدیده‌های پراش نور و تداخل برای تغییر اختلاف فاز به اختلاف دامنه برای مشاهده سلول‌های زنده و نمونه‌های رنگ‌آمیزی استفاده می‌کند. تفاوت میکروسکوپ کنتراست فاز با میکروسکوپ معمولی در این است که به جای دیافراگم متغیر از یک دیافراگم حلقوی، به جای عدسی شیئی معمولی از یک عدسی شیئی با صفحه فاز استفاده می شود و یک تلسکوپ برای هم محوری در نظر گرفته شده است.
اصول اولیه میکروسکوپ کنتراست فاز:
با استفاده از تفاوت در ضریب شکست و ضخامت بین اجزای ساختاری مختلف جسم، اختلاف مسیر نوری که از قسمت‌های مختلف جسم می‌گذرد به اختلاف دامنه (شدت نور) تبدیل می‌شود و از طریق عدسی کندانسور با دیافراگم حلقوی و اختلاف فاز با صفحه فاز عدسی شیئی میکروسکوپ مشاهده را تشخیص می دهد. عمدتاً برای مشاهده سلول‌های زنده یا بخش‌های بافت بدون رنگ استفاده می‌شود و گاهی اوقات می‌توان از آن برای مشاهده نمونه‌های رنگ‌آمیزی که فاقد کنتراست هستند نیز استفاده کرد.
تفاوت مسیر نوری نور مرئی که از نمونه عبور می کند به یک اختلاف دامنه تبدیل می شود، در نتیجه کنتراست بین ساختارهای مختلف بهبود می یابد و ساختارهای مختلف به وضوح قابل مشاهده هستند. نور پس از عبور از نمونه شکسته می شود و از مسیر نوری اولیه منحرف می شود و 1/4λ (طول موج) به تاخیر می افتد. اگر 1/4λ کم یا زیاد شود، اختلاف مسیر نوری 1/2λ می‌شود و دو پرتو بعد از محور نور تداخل می‌کنند. دامنه را تقویت، کم یا زیاد کنید، کنتراست را بهبود بخشید.
میکروسکوپ کنتراست فاز دو عملکرد دارد که میکروسکوپ های دیگر ندارند: ① نور مستقیم (نور زمینه در میدان دید) را از نور پراش شده توسط جسم جدا می کند. ② حدود نیمی از طول موج را از فاز حذف می کند به طوری که نمی تواند برهمکنش داشته باشد و در نتیجه باعث تغییر در شدت می شود.
