اصل کار میکروسکوپ کانفوکال لیزری

اصل کار میکروسکوپ کانفوکال لیزری

اصل کار میکروسکوپ کانفوکال لیزری
میکروسکوپ کانفوکال لیزری Olympus یک آشکارساز است که می تواند سیگنال ها را دریافت کند. اصل کار آن این است که یک منبع نور نقطه ای پس از عبور از میکروسکوپ فلورسانس به عنوان یک نقطه بزرگ شده به نام "دیسک هوا" تصویر می شود. در یک میکروسکوپ کانفوکال تداخل سنجی نور سفید استاندارد، نور ساطع شده در خارج از صفحه کانونی توسط سوراخی مسدود می شود که اندازه آن تعیین می کند چه مقدار از دیسک Airy می تواند وارد آشکارساز شود. هرچه سوراخ سوزن کوچکتر باشد، تصویر به دست آمده واضح تر است و تصویر تیره تر می شود زیرا بیشتر نور از بین می رود. هرچه سوراخ دیافراگم کوچکتر باشد، وضوح بهتر است، اما - دوباره - سیگنال نور بیشتری از دست می رود. میکروسکوپ کانفوکال لیزری Olympus می تواند همزمان یک تصویر CCD رنگی و یک تصویر هم کانونی اسکن لیزری ارائه دهد. میکروسکوپ لیزری کانفوکال الیمپوس قابلیت اندازه‌گیری ارتفاع را از طریق یک منبع نور، یک نمونه و یک آشکارساز دارد. هنگامی که نمونه در صفحه کانونی عدسی شیئی قرار می گیرد و نور لیزر منعکس شده از سطح نمونه به دیافراگم کانفوکال متمرکز می شود، ردیاب نوری سیگنال نمونه را دریافت می کند. هنگامی که نمونه در موقعیت خارج از فوکوس قرار دارد، دیافراگم کانفوکال سیگنال لیزر را دریافت نمی کند، بنابراین فقط سیگنال در فوکوس جمع آوری می شود. این ویژگی می تواند عملکرد برش نوری میکروسکوپ کانفوکال لیزری Olympus را تحقق بخشد.

مزایای میکروسکوپ لیزری کانفوکال
1. با استفاده از نور لیزر به عنوان منبع نور، پس از علامت گذاری پروب های فلورسنت مربوطه، نمونه نقطه به نقطه اسکن می شود تا لایه به لایه تصاویر مقطع نوری دو بعدی به دست آید. عملکرد "سلول CT" را دارد و می تواند توسط نرم افزار بازسازی سه بعدی کامپیوتری برای به دست آوردن تصاویر سه بعدی پشتیبانی شود، که می تواند در هر زاویه ای بچرخد تا شکل سه بعدی و رابطه فضایی سلول ها و بافت ها را مشاهده کند.

2. می تواند سلول ها و بافت های زنده را بدون آسیب مشاهده کند و اطلاعات فیزیولوژیکی سلول های زنده مانند غلظت یون کلسیم و مقدار pH در سلول ها را به صورت دینامیکی اندازه گیری کند.

3. می تواند سیالیت غشای سلولی، ارتباطات بین سلولی، همجوشی سلولی، خاصیت ارتجاعی اسکلت سلولی و غیره را اندازه گیری کند و می تواند به عنوان یک "چاقوی سبک" برای تکمیل "جراحی" درون سلولی استفاده شود. این فناوری مشاهده و اندازه گیری در محل پویا و کمی سلول ها و بافت های زنده را امکان پذیر می کند.