چرا بزرگنمایی یک عدسی روغنی از یک عدسی شیئی معمولی بزرگتر است؟
دلایلی که چرا باید باکتری ها قبل از رنگ آمیزی در آزمایشات میکروبیولوژیکی ثابت شوند:
1: سلول ها را بکشید و رنگ را آسان کنید.
دو: کاری کنید که باکتری ها به لام شیشه ای بچسبند و به راحتی با آب شسته نشوند.
هنگام تثبیت، به آرامی خشک کنید. اگر واقعاً می خواهید روند کار را تسریع کنید، می توانید آن را چند بار در فاصله ای بالای شعله یک لامپ الکلی خشک کنید. شیشه را خشک نکنید تا گرم شود، در غیر این صورت ممکن است شکل حیات باکتریایی را از بین ببرد.
رنگ آمیزی گرم و مشاهده میکروسکوپی باکتری ها
اصل تجربی
اصل رنگ آمیزی گرم: واکنش های مختلف باکتری ها به رنگ آمیزی گرم به دلیل ترکیب و ساختار متفاوت دیواره سلولی آنها است. دیواره سلولی باکتری های گرم مثبت عمدتاً شبکه ای از پپتیدوگلیکان ها است. هنگامی که با اتانول درمان می شود، اندازه منافذ ساختار شبکه به دلیل کم آبی کوچکتر می شود و نفوذپذیری کاهش می یابد، در نتیجه باعث تشکیل کمپلکس کریستال بنفش-ید می شود. این ماده به راحتی شسته نمی شود و در سلول ها باقی می ماند. پس از رنگزدایی و رنگآمیزی، رنگ آبی-بنفش رنگ اولیه همچنان حفظ میشود. لایه پپتیدوگلیکان دیواره سلولی باکتری های گرم منفی نازک است و محتوای چربی بالایی دارد. بنابراین، در هنگام رنگزدایی، لیپیدها توسط اتانول (یا استون) حل میشوند و نفوذپذیری دیواره سلولی افزایش مییابد و باعث میشود که بلور بنفش-ید به راحتی شسته شود. پس از رنگ آمیزی با ضد لکه، سلول ها با رنگ قرمز رنگ ضد رنگ آمیزی می شوند. اصل تصویربرداری میکروسکوپی: میکروسکوپهای نوری معمولی مدرن از دو سیستم عدسی چشمی و عدسیهای شیئی برای بزرگنمایی تصاویر استفاده میکنند، بنابراین اغلب به آنها میکروسکوپ مرکب میگویند. در سیستم نوری میکروسکوپ، عملکرد عدسی شیئی حیاتی ترین است. عدسی روغنی بیشترین بزرگنمایی را دارد و برای تحقیقات میکروبیولوژیکی مهم ترین است. هدف اصلی از افزودن قطرات روغن لنز بین لام و لنز، افزایش روشنایی نور و افزایش وضوح میکروسکوپ است. استفاده از روغن به جای هوا به عنوان محیط انتشار نور، شکست یا بازتاب کلی نور را کاهش می دهد و تصویر مشاهده شده را واضح تر می کند.
به دنبال کلنی های باکتریایی باشید که باید زیر میکروسکوپ با بزرگنمایی کم مشاهده شوند (اسلاید را به حرکت درآورید، اگر سایه قرمز را احساس کردید، فورا متوقف شوید، بزرگنمایی را تنظیم کنید، اگر کلنی نیست، به نگاه کردن ادامه دهید)، لوله لنز را بالا ببرید. و سپس به لنز روغنی بروید. یک قطره روغن سرو را به ناحیه نمونه اضافه کنید و از تنظیم کننده درشت استفاده کنید تا بشکه لنز را با دقت پایین بیاورید تا لنز روغن در روغن عدسی غوطه ور شود و تقریباً با نمونه تماس پیدا کند. کندانسور را به بالاترین موقعیت ببرید و دیافراگم را باز کنید. از تنظیم کننده درشت استفاده کنید تا بشکه لنز را به آرامی بالا بیاورید تا زمانی که تصویر جسم در میدان دید ظاهر شود و از تنظیم کننده ظریف برای واضح و فوکوس کردن آن استفاده کنید.
