کدام نوع میکروسکوپ باید برای مشاهده باکتری استفاده شود
میکروسکوپ نوری ابزار بسیار دقیقی برای دیدن و بزرگنمایی اجسام است. میکروسکوپ های نوری مختلف می توانند انواع مختلف نمونه را بررسی کنند. کاربران باید بتوانند میزان اندازه باکتری را در زمینه هایی مانند تحقیقات میکروبی، تحقیقات گیاهی و تحقیقات حیوانی مشاهده کنند. این مقاله به بررسی عمیق بهترین نوع میکروسکوپ برای استفاده در هنگام مرتب سازی نمونه ها می پردازد.
اندازه میکروب ها، وضوح دید انسان، قدرت تفکیک میکروسکوپ ها و عوامل دیگر همگی می توانند برای پاسخ به این سوال استفاده شوند.
1. سلول های باکتریایی معمولاً دارای قطر چند میکرون هستند. اندازه اشریشیا کلی را در نظر بگیرید که طول آن حدود 1 میکرومتر و عرض آن 0.5 میکرومتر است.
2. وضوح کوچکترین فاصله ای است که در آن دو نقطه جسم به طور مشخص از یکدیگر متمایز می شوند.
کمترین فاصله بین دو نقطه جسم که به محض بزرگنمایی میکروسکوپ روی تصویر به وضوح قابل تشخیص است، وضوح میکروسکوپ نامیده می شود.
وضوح ابزار ظرفیت آن را برای ارائه جزئیات در مورد ریزساختار چیزی که اندازه گیری می شود، توصیف می کند. هر چه رزولوشن بالاتر باشد، اطلاعات ارائه شده با جزئیات بیشتر است. فراتر از حداکثر بزرگنمایی، بزرگنمایی به عنوان بزرگنمایی نامعتبر شناخته می شود و بزرگنمایی نامعتبر قادر به آشکارسازی جزئیات ساختاری خاص نیست.
3. کمترین فاصله ای که چشم انسان معمولی می تواند بین دو نقطه تشخیص دهد 0.1 میلی متر است، مشروط بر اینکه نور کافی وجود داشته باشد و فاصله آن بیش از یک فوت باشد.
4. در نتیجه، بزرگنمایی باید حداقل: 0.1mm 0.5um=1000 5=200 بار باشد تا بتوان وجود میکروب را تشخیص داد. با این حال، باکتری (اشریشیا کلی) که در این بزرگنمایی دیده می‌شود، فقط یک لکه کوچک است. بزرگنمایی میکروسکوپ باید تنظیم شود تا جزئیات ساختاری ریزتر دیده شود.
5. طیف نور مرئی (390-770 نانومتر)، که مقدار فوق العاده بزرگنمایی میکروسکوپ نوری استاندارد است، وضوح این دستگاه ها را معمولاً به بیش از 1000 برابر محدود می کند. بزرگنمایی های بیش از 1000 برابر بزرگنمایی نامعتبر در نظر گرفته می شوند و نمی توانند اطلاعات ساختاری دقیق تری ارائه دهند.
6. میکروسکوپ الکترونی ظرفیت بزرگنمایی 800 برابری دارد. این بر اساس همان فرض اساسی مانند یک میکروسکوپ نوری معمولی کار می کند، یعنی استفاده از ولتاژ بالا برای تولید امواج الکترونی با طول موج کوتاه.
باکتری هایی که فقط به اندازه نوک سوزن هستند و به صورت نقاط ریز ظاهر می شوند به سختی می توانند با بزرگنمایی 400 برابر (10x,40x) شناسایی شوند. برای اکثر مشاهدات، ما به بزرگنمایی تا 1000 برابر (10x، 100x) ادامه می دهیم. در حال حاضر، ظاهر باکتری هنوز به وضوح دیده می شود و با رنگ آمیزی مناسب، می توان تاژک ها را همچنان به وضوح مشاهده کرد. برای بزرگنمایی 1000 برابر به یک لنز روغنی نیاز دارید. "عدسی روغن" مستلزم قرار دادن یک قطره روغن سدر بین شیشه پوشش و عدسی شیئی است. از آنجایی که روغن سدر ضریب شکست نور بیشتری نسبت به هوا دارد، می توان از بزرگنمایی بالاتری استفاده کرد.
10x و 40x نشان می دهد که لنز 10 برابر و 40 برابر بزرگ شده است. بزرگنمایی چشمی در بزرگنمایی شیء ضرب می شود تا بزرگنمایی کل میکروسکوپ به دست آید. چشمی ها و عدسی های شیئی میکروسکوپ های مورد استفاده در مقطع راهنمایی قابل تغییر هستند و چشمی ها عموماً 5x و 10x هستند. چشمی یک میکروسکوپ کوچک به طور کلی فقط 10 برابر است و من اشریشیا کلی (E.coli)، استافیلوکوکوس اورئوس، باسیلوس سوبتیلیس و باسیلوس مگاتریوم (برای دیدن هاگ ها استفاده می شود) را دیده ام.
