نقش هر فیلتر در میکروسکوپ فلورسانس

نقش هر فیلتر در میکروسکوپ فلورسانس

مهمترین مسئله در مورد میکروسکوپ فلورسانس ترکیب فیلترها است و فیلتر تحریک و فیلتر محافظ باید برای بدنه فلورسنت مشاهده شده مناسب بوده و با یکدیگر مطابقت داشته باشند. برای اهداف خاص، اگر در انتخاب فیلتر خطایی وجود داشته باشد، ممکن است منجر به سوء تفاهم و حتی نتایج نادرست شود. دستاوردهای فناوری میکروسکوپ فلورسانس و استفاده از فیلترهای با کیفیت بالا و گروه های فیلتر مبتکرانه جدایی ناپذیر است. انواع مختلفی از فیلترها برای میکروسکوپ فلورسانس وجود دارد.

1. فیلتر جذب کننده حرارت
فیلتر جذب کننده گرما یک فیلتر ضروری برای جلوگیری از آسیب تابش حرارتی در طیف منبع نور به گروه دستگاه نوری است. میکروسکوپ‌های پیشرفته اولیه مجهز به بطری‌هایی به شکل طبل بودند که می‌توانستند آب مقطر را به‌عنوان دستگاه جذب گرما در خود نگه دارند. میکروسکوپ‌های تحقیقاتی در مقیاس بزرگ مدرن مجهز به فیلترهای جاذب حرارت شیشه‌ای در جعبه‌های نور منبع نور یا محفظه‌هایی هستند که ورقه‌های شیشه‌ای شفاف و کمی زرد هستند. فیلترهای Leitz KG1 (2 میلی متر) و BG38 (4 میلی متر) می توانند تقریباً تمام طیف های ماوراء بنفش و نور مرئی را منتقل کنند و آنها را فیلترهایی با شار نور تا 98٪ می کند. این تنها خطوط تابش گرمایی مادون قرمز را به طور انتخابی جذب می کند.

2. فیلتر تحریک
فیلترهای تحریک می توانند به طور انتخابی خطوط طیفی با طول موج بلند را جذب کنند و فقط نور فرابنفش را منتقل کنند. فیلترهای نور بنفش، آبی و سبز فیلترهای تحریک هستند. فیلترهای Zeiss، Reichert، Olympus B-series، G-series، سری BG، سری Shott UG، Opton H، G، سری BP، سری Leitz BP و سایر فیلترها همگی فیلترهای تحریک هستند.

3. فیلتر مسدود کردن
فیلتر مسدود کننده فیلتری است که به طور انتخابی خطوط طیفی با طول موج کوتاه و تابش مادون قرمز را جذب می‌کند و به ناظر اجازه می‌دهد تا فلورسانس ساطع شده از جسم مورد آزمایش را ببیند و در عین حال از قرنیه در برابر آسیب UV محافظت کند.

4. فیلتر جداسازی نور رنگ
فیلتر جداسازی نور رنگ فیلتری است که نور تحریک را به جسم مورد آزمایش منعکس می کند و باعث می شود جسم فلورسانس ساطع کند و سپس فلورسانس را به چشمی منتقل می کند. این نوع فیلتر فقط در متمرکز کننده های پرتو در حال سقوط قابل استفاده است، در حالی که میکروسکوپ فلورسانس نور انتقالی نیازی به جداسازی رنگ ندارد.

5. فیلتر تداخل
فیلتر تداخلی نوعی فیلتر تحریکی با کارایی بالا است. این فیلتری است که از روی هم قرار دادن چند لایه فلزی نازک بین دو ورقه شیشه ای صیقلی ساخته می شود. ضریب شکست هر لایه فلزی نازک متفاوت است، بنابراین خطوط طیفی با طول موج های مختلف منبع نور روشنایی به طور مکرر بر روی هر لایه فلزی منعکس می شود و باعث می شود برخی از طول موج های خطوط طیفی به دلیل تداخل مخرب از بین بروند، در حالی که برخی دیگر با تقویت تداخل افزودنی و از طریق منتقل می شود. این منجر به فیلتری با طیف انتقال باریک، عرض نیم پیک تنها 6 ~ 20 نانومتر و انتقال 60٪ تا 70٪ می شود.