تفاوت بین میکروسکوپ الکترونی و میکروسکوپ دیجیتال
«میکروسکوپ دیجیتال» در واقع یک دستگاه تصویربرداری دیجیتال است که به میکروسکوپ نوری اضافه شده است که می تواند تصویر تشکیل شده توسط میکروسکوپ را مستقیماً بر روی صفحه نمایش رایانه نمایش دهد. این بر اساس میکروسکوپ نوری است، و اصل تصویربرداری میکروسکوپ الکترونی تفاوت اساسی است. در اینجا باید بین وضوح و بزرگنمایی تمایز قائل شویم. هنگامی که یک جسم ظریف بزرگنمایی و تصویربرداری می شود، وضوح بالای آن به طول موج موج نور منعکس شده بستگی دارد. هر چه طول موج کوتاهتر باشد، وضوح بالاتر است. میکروسکوپهای الکترونی از تصویربرداری اشعه ایکس با طول موج بسیار کوتاهتر از نور مرئی معمولی استفاده میکنند، البته وضوح بسیار بالایی دارد، در حالی که بزرگنمایی «میکروسکوپهای دیجیتال» معمولی میتواند زیاد باشد، اما وضوح قابل بهبود نیست.
قدرت تفکیک میکروسکوپ نوری به طول موج موج نور مربوط می شود. برای اجسام نزدیک و کوچکتر از طول موج نور، میکروسکوپ نوری فاقد قدرت است. طول موج حرکت الکترون بسیار کوتاهتر از طول موج موج نور است، بنابراین اجسام کوچکتر دیده می شوند. میکروسکوپ نوری یک سیستم تصویربرداری بزرگنمایی شده است که از مجموعهای از عدسیهای نوری تشکیل شده است، در حالی که میکروسکوپ الکترونی دارای جریان الکترونی به جای نور مرئی، یک میدان مغناطیسی به جای عدسیها و حرکت الکترون به جای فوتون است، به طوری که اجسام کوچکتر از آنهایی هستند که میتوانند. توسط سیستم نوری قابل مشاهده است.
میکروسکوپ الکترونی ابزاری در مقیاس بزرگ است که از پرتوهای الکترونی به عنوان منبع روشنایی برای ایجاد تصاویر روی صفحه فلورسنت از طریق انتقال یا انعکاس جریان الکترونی روی نمونه و بزرگنمایی چند مرحله ای عدسی الکترومغناطیسی استفاده می کند، در حالی که نوری میکروسکوپ از روشنایی نور مرئی برای تشکیل تصویر بزرگنمایی از اجسام کوچک ابزار نوری استفاده میکند. به طور خلاصه، میکروسکوپ های الکترونی از جنبه های زیر با میکروسکوپ های نوری تفاوت دارند:
1. منابع روشنایی مختلف. منبع روشنایی که توسط میکروسکوپ الکترونی استفاده می شود، جریان الکترونی است که توسط تفنگ الکترونی ساطع می شود، در حالی که منبع روشنایی میکروسکوپ نوری، نور مرئی (نور خورشید یا نور) است. از آنجایی که طول موج جریان الکترونی بسیار کوتاهتر از طول موج نور است، بزرگنمایی و وضوح میکروسکوپ الکترونی به طور قابل توجهی بیشتر از میکروسکوپ نوری است.
2. لنزهای مختلف. عدسی بزرگنمایی در میکروسکوپ الکترونی یک عدسی الکترومغناطیسی است (یک سیم پیچ الکترومغناطیسی حلقوی که میتواند یک میدان مغناطیسی در قسمت مرکزی ایجاد کند)، در حالی که عدسی شیئی میکروسکوپ نوری یک عدسی نوری ساخته شده از شیشه است. سه گروه از عدسی های الکترومغناطیسی در میکروسکوپ الکترونی وجود دارد که معادل عملکرد عدسی کندانسور، عدسی شیئی و چشمی در میکروسکوپ نوری است.
3. اصل تصویربرداری متفاوت است. در میکروسکوپ الکترونی، پرتو الکترونی که بر روی نمونه مورد بررسی قرار میگیرد، توسط عدسی الکترومغناطیسی تقویت میشود و به تصویربرداری روی صفحه فلورسنت میرسد یا بر روی فیلم حساس به نور برای تصویربرداری عمل میکند. مکانیسم تفاوت در چگالی الکترون ها به این صورت است که وقتی پرتو الکترونی روی نمونه مورد آزمایش قرار می گیرد، الکترون های فرودی با اتم های ماده برخورد می کنند تا پراکندگی ایجاد کنند. از آنجایی که قسمت های مختلف نمونه دارای درجات پراکندگی متفاوتی برای الکترون ها هستند، تصویر الکترونی نمونه در سایه ها ارائه می شود. . تصویر جسم نمونه در میکروسکوپ نوری به صورت تفاوت در روشنایی ارائه می شود که ناشی از تفاوت در مقدار نور جذب شده توسط ساختارهای مختلف نمونه مورد بازرسی است.
4. روش های تهیه نمونه مورد استفاده متفاوت است. روش آماده سازی نمونه های سلول بافتی که برای مشاهده میکروسکوپ الکترونی استفاده می شود، پیچیده است و دشواری فنی و هزینه آن بالا است. معرف ها و عملیات ویژه در پیوندهای جمع آوری مواد، تثبیت، آبگیری و جاسازی مورد نیاز است. در نهایت، بلوکهای بافت جاسازیشده باید در برشهای نمونه فوقالعاده نازک با ضخامت 50-100 نانومتر در یک اولترا میکروتوم قرار داده شوند. نمونه های مشاهده شده توسط میکروسکوپ نوری عموماً بر روی اسلایدهای شیشه ای مانند نمونه های برش بافت معمولی، نمونه های اسمیر سلولی، نمونه های فشرده سازی بافت و نمونه های قطره سلولی قرار می گیرند.
