از نظر ساختاری، میکروسکوپ های کنتراست فاز با میکروسکوپ های نوری معمولی از این نظر متفاوت هستند:
1. دیافراگم حلقوی دارای یک دیافراگم با دهانه حلقه است که بین منبع نور و کندانسور نصب می شود. عملکرد این است که نوری را که از کندانسور عبور می کند، یک مخروط نور توخالی تشکیل می دهد و روی نمونه تمرکز می کند.
2. صفحه فاز میکروسکوپ کنتراست فاز یک صفحه فاز پوشیده شده با فلوراید منیزیم را در داخل عدسی شیئی اضافه می کند تا فاز نور مستقیم یا نور پراکنده را 1/4λ به تاخیر بیاندازد. روی صفحه فاز دو ناحیه وجود دارد، قسمتی که نور مستقیم از آن عبور می کند «سطح مزدوج» و قسمتی که نور پراش شده از آن عبور می کند «سطح جبران» نامیده می شود. صفحات فاز با توجه به اثرات کار به دو نوع تقسیم می شوند:
(1) صفحه فاز بعلاوه: نور مستقیم 1/4λ به تأخیر می افتد، امواج نوری دو مجموعه از امواج نور روی هم قرار می گیرند و دامنه افزایش می یابد. ساختار نمونه روشن تر از محیط اطراف است و کنتراست روشن (یا کنتراست منفی) ایجاد می کند.
(2) صفحه فاز B بعلاوه: نور پراش شده 1/4λ به تأخیر می افتد و امواج نور دو گروه نور پس از تراز شدن محور کم می شود و دامنه کوچکتر می شود. ساختار نمونه تیره تر از محیط اطراف است و کنتراست تیره (یا کنتراست مثبت) را تشکیل می دهد. عدسی شیئی با صفحه فاز، لنز شیئی با کنتراست فاز نامیده می شود که اغلب با "PH" روی محفظه لنز شیئی مشخص می شود.
تلسکوپ قابل تنظیم محور
میکروسکوپ کنتراست فاز مجهز به یک تلسکوپ تنظیم کواکسیال است (که با علامت "CT" روی محفظه مشخص شده است) که برای تنظیم تصویر دیافراگم حلقوی کاملاً منطبق بر سطح مزدوج صفحه فاز استفاده می شود. دستیابی به درمان ویژه از نور مستقیم و نور پراش.
هنگام استفاده، چشمی را از یک طرف بردارید، تلسکوپ تنظیم کواکسیال را وارد کنید و تنظیم کواکسیال را برای تنظیم فوکوس تلسکوپ تنظیم کنید. دو حلقه در میدان دید وجود خواهد داشت که مزدوج حلقه دیافراگم حلقوی روشن و صفحه فاز تیره تر است. حلقه صورت سپس دو پیچ تنظیم دیافراگم حلقوی را روی کندانسور بچرخانید تا دو حلقه کاملاً روی هم قرار گیرند. اگر هاله روشن خیلی کوچک یا خیلی بزرگ است، می توانید دستگیره بالا و پایین کندانسور را تنظیم کنید تا دو حلقه کاملاً جا بیفتند. اگر کندانسور تا یک نقطه بالا بالا رفته یا به نقطه پایین کاهش یافته است و هنوز نمی توان آن را اصلاح کرد، لغزش خیلی ضخیم است و باید تعویض شود. پس از اتمام تنظیم، تلسکوپ تنظیم کواکسیال را می توان برداشت و چشمی را می توان جایگزین کرد.
فیلتر سبز
برای تنظیم طول موج منبع نور استفاده می شود. طول موج های مختلف نور باعث تغییر فاز می شود. برای به دست آوردن یک اثر کنتراست فاز خوب، یک میکروسکوپ کنتراست فاز نیاز به استفاده از نور تک رنگ با محدوده طول موج نسبتاً باریک دارد که معمولاً با یک فیلتر سبز تنظیم می شود.
مراحل استفاده از میکروسکوپ کنتراست فاز به شرح زیر است:
① با توجه به ماهیت و الزامات نمونه مورد بازرسی، یک لنز شیئی کنتراست فاز مناسب انتخاب کنید.
②اسلاید نمونه را روی صحنه قرار دهید و مرکز محور نوری را تنظیم کنید.
③از تلسکوپ تنظیم کواکسیال استفاده کنید، دیافراگم حلقه را طوری تنظیم کنید که کاملاً با حلقه سطح مزدوج روی صفحه فاز همپوشانی داشته باشد و سپس چشمی را تعویض کنید. در طی فرآیند مشاهده، هر بار که مضرب عدسی شیئی تغییر می کند، لازم است دیافراگم حلقوی را مجدداً تنظیم کرد تا با حلقه سطح مزدوج صفحه فاز منطبق شود.
④ یک فیلتر سبز رنگ اضافه کنید و طبق مراحل عملکرد یک میکروسکوپ نوری معمولی مشاهده کنید.
5 میکروسکوپ معکوس
ساختار میکروسکوپ معکوس اساساً مشابه میکروسکوپ معمولی است، با این تفاوت که موقعیت عدسی شیئی و سیستم روشنایی با هم رد و بدل می شود، اولی زیر صحنه و دومی بالای استیج است. عمدتاً برای مشاهده سلولهای زنده کشتشده استفاده میشود و باید مجهز به یک لنز شیئی کنتراست فاز باشد.
میکروسکوپ بیولوژیکی معکوس
6 میکروسکوپ پلاریزه
میکروسکوپ پلاریزه می تواند برای تشخیص مواد دوشکست کننده مانند کروموزوم ها، کلاژن، رشته ها و غیره استفاده شود.
میکروسکوپ پلاریزه پروجکشن Altec BK-POL
میکروسکوپ پلاریزه انتقالی Altec BK-POL
تفاوت میکروسکوپ های معمولی در این است:
①منبع نور میکروسکوپ پلاریزه مجهز به یک پلاریزه کننده (پلاریزه) است، به طوری که نور ورودی به میکروسکوپ نور پلاریزه است.
② یک آنالایزر در بشکه عدسی وجود دارد (آنالایزر، پلاریزه کننده ای که جهت قطبش آن عمود بر پلاریزه کننده است).
③ از یک مرحله چرخشی استفاده کنید. هنگامی که یک ماده انکسار منفرد روی صحنه قرار می گیرد، مهم نیست که صحنه چگونه می چرخد، نوری در میکروسکوپ دیده نمی شود زیرا دو قطبشگر عمودی هستند و هنگامی که یک ماده انکسار دوگانه قرار می گیرد، زیرا نور از این نوع عبور می کند. هنگامی که شیء چرخانده می شود، شی منحرف می شود تا با چرخاندن صحنه بتوان جسم را تشخیص داد.
④ مجهز به جبران کننده یا صفحه فاز.
⑤از لنز شیئی بدون استرس استفاده کنید.
