اصول، ویژگی ها و استفاده از میکروسکوپ فلورسانس
اصل و ویژگی های ساختاری میکروسکوپ فلورسانس: میکروسکوپ فلورسانس از یک منبع نور نقطه ای با بازده نوری بالا استفاده می کند که طول موج مشخصی از نور (مانند نور ماوراء بنفش 3650 اینچ یا نور آبی فرابنفش ماوراء بنفش 4200 اینچ) را از طریق یک سیستم فیلتر رنگ به عنوان نور تحریک ماده فلورسانس در نمونه برانگیخته می شود تا رنگ های مختلف فلورسانس را ساطع کند و سپس از طریق بزرگنمایی شی و چشمی مشاهده می شود. به این ترتیب، حتی با فلورسانس ضعیف، به راحتی قابل تشخیص و در زیر زمینه های متضاد قوی است که عمدتاً برای مطالعه ساختار و عملکرد سلول و همچنین ترکیب شیمیایی استفاده می شود. ساختار اصلی یک میکروسکوپ فلورسانس از یک میکروسکوپ نوری معمولی و برخی از لوازم جانبی (مانند منبع نور فلورسنت، فیلتر تحریک، جداکننده پرتو دو رنگ و فیلتر مسدود کننده و غیره) تشکیل شده است. منابع نور فلورسنت - معمولاً از لامپ های جیوه ای با فشار فوق العاده بالا (50-200) استفاده می کنند که می توانند نور با طول موج های مختلف ساطع کنند. با این حال، هر ماده فلورسنت دارای طول موج نور تحریکی است که قویترین فلورسانس را تولید میکند، بنابراین فیلترهای تحریک (معمولاً فیلترهای تحریک ماوراء بنفش، بنفش، آبی و سبز) باید اضافه شوند تا فقط یک طول موج مشخص از نور تحریک عبور کند و روشن شود. نمونه، در حالی که تمام نورهای دیگر را جذب می کند. هر ماده پس از تابش نور برانگیخته، فلورسانس مرئی با طول موج بلندتر از تابش را در مدت زمان بسیار کوتاهی ساطع می کند. فلورسانس دارای ویژگی است و به طور کلی ضعیف تر از نور تحریک است. به منظور مشاهده فلورسانس خاص، باید یک فیلتر مسدود کننده (یا سرکوب کننده) در پشت عدسی شیئی اضافه شود.
این دو عملکرد دارد: اول اینکه نور تحریک را جذب کرده و از ورود نور به چشمی جلوگیری می کند تا از ایجاد اختلال در فلورسانس و آسیب به چشم جلوگیری کند. ثانیاً، فلورسانس خاصی را انتخاب می کند و اجازه می دهد تا از آن عبور کند و یک رنگ فلورسانس خاص را نمایش می دهد. هر دو نوع فیلتر باید برای استفاده با هم انتخاب شوند.
