روش های آماده سازی نمونه های میکروسکوپ نوری و الکترونی
روش های تهیه میکروسکوپی به طور کلی شامل چهار دسته است: روش برش، روش کل مونت، روش اسمیر و روش قرص.
①روش برش. ضخامت برش یک میکروسکوپ نوری بین 2 تا 25 میکرون است. به طور کلی، ضخامت برش حدود 10 میکرون برای مواد حیوانی و گیاهی مناسب است. روش های برش بندی بسته به محیط جاسازی متفاوت است. معمولاً از روش برش پارافینی، روش برش کلوئیدی پنبه، روش برش منجمد و روش متاکریلات اتیلن گلیکول (به عنوان روش GMA) استفاده می شود. روش برش پارافینی شامل مراحلی مانند تثبیت، تعبیه، برش، رنگآمیزی، آبگیری و نصب است. نکته کلیدی این است که مواد بیولوژیکی را در پارافین قرار دهید، از پارافین به عنوان تکیه گاه استفاده کنید و مواد بیولوژیکی غوطه ور در بلوک مومی را به برش های نازک ایده آل برش دهید. فرآیند عملیات عبارت است از: تثبیت → شستشو با آب → آبگیری گام به گام الکل از غلظت کم به غلظت بالا → شفافیت زایلن → غوطه وری موم → تعبیه → برش → پچ → موم زدایی زایلن → درمان مرحله به مرحله الکل از غلظت بالا به غلظت کم. در نهایت، به آب ← رنگرزی ← آبگیری گام به گام از غلظت کم به الکل با غلظت بالا ← شفافیت زایلن → آب بندی چسب رزینی تبدیل می شود. مراحل اساسی در تمام تکنیک های تولید یکسان است.
②روش آب بندی انتگرال. روش آماده سازی تمام کوه برای تک سلولی، موجودات کوچک، یا اندام های پراکنده. این روش همچنین به مراحل مختلف تثبیت، لکه گیری، آبگیری، شفافیت و نصب نیاز دارد. از این روش برای تهیه قطعات دهانی پارامسیا و حشرات استفاده می شود.
③روش اسمیر. یک روش آماده سازی که در آن نمونه های بیولوژیکی به راحتی پراکنده شده روی یک لام شیشه ای پخش می شوند. اسمیر خون یک نمونه است.
④روش فشار دادن تبلت. بافت ها یا بافت های طبیعی و به راحتی پراکنده که پس از پردازش به راحتی پراکنده می شوند، مانند اسپرماتوسیت های حیوانی و سلول های نوک ریشه را روی یک لام شیشه ای قرار دهید، یک ورقه پوششی اضافه کنید و بافت را با قدرت له کنید تا سلول ها یا سلول های داخل آن بسازید. در یک لایه از روش تولید پخش می شود. روش پرس اغلب برای مشاهده کروموزوم ها استفاده می شود که معمولا با استات سرخابی، قرمز لیکن و فوشین کربولیک رنگ آمیزی می شوند.
