میکروسکوپ - شرح عملکرد ساختار
عدسی شیئی
عدسی شیئی بخش نوری میکروسکوپ برای اولین تصویربرداری است که از چندین گروه از عدسی ها به هم چسبیده تشکیل شده است. فاصله کانونی کل فاصله کانونی گروه لنز است.
بسته به درجه تصحیح انحرافات رنگی، انحرافات، انحنای میدان و غیره و ویژگی های اختصاصی آنها، چندین نوع هدف وجود دارد: (طرح) اهداف رنگی، (طرح) اهداف آپوکرومات، اهداف فوق پلان و تخصصی و غیره. .
انحراف رنگی: تفاوت رنگ در تصویربرداری از منابع نور مرئی (نور چند رنگ). یک نقطه جسم سفید نمی تواند یک نقطه تصویر سفید را تشکیل دهد، اما یک نقطه تصویر رنگی را تشکیل می دهد.
انحراف: نقطه پراکنده (دایره گیجی) که در صفحه تصویر پس از شکستن پرتو نور ساطع شده از نقطه جسم خارج از محور نوری توسط سیستم نوری ایجاد می شود.
انحراف کما: خطای تصویربرداری نامتقارن دنباله دار مانند پس از شکست پرتو نوری که از یک نقطه جسم خارج از محور نوری ساطع می شود توسط سیستم نوری.
عدسی شیئی آکروماتیک شیئی آکروماتیک: عدسی شیئی معمولی که با "Ach" روی پوسته مشخص شده است. عمدتاً انحراف رنگی (قرمز، آبی)، انحراف کروی (زرد، سبز) و کما تصویربرداری محور نوری را اصلاح کنید. انحنای میدان بزرگ است.
عدسی شیئی آپوکروماتیک آپوکروماتیک: عدسی شیئی درجه بالا با ساختار دقیق و پیچیده، ساخته شده از شیشه مخصوص مانند فلوریت و با علامت "Apo" روی پوسته. بر اساس عدسی شیئی آکروماتیک، همچنین نیاز به اصلاح طیف ثانویه، انحراف قرمز، سبز و آبی و انحراف کروی قرمز و آبی دارد. لنز شیئی آپوکروماتیک دارای تصحیح انحراف کامل، دیافراگم عددی بزرگتر، وضوح بالاتر، بزرگنمایی موثر بالاتر و کیفیت تصویربرداری برتر است.
لنز شیئی نیمه آپوکروماتیک: هزینه عملکرد و کیفیت تصویربرداری بین لنز شیئی آکروماتیک و لنز شیئی آپوکروماتیک، که به عنوان لنز شیئی فلورسپار (فلوریت) نیز شناخته می شود، با "FL" مشخص شده است. انحراف رنگی و انحراف کروی قرمز و آبی قابل اصلاح است.
هدف طرح: عمدتاً نقص انحنای میدان را اصلاح می کند، به طوری که میدان دید صاف، تصویربرداری واقع بینانه و مشاهده راحت است. این یک لنز نیم دایره ای در پشت است که به مجموعه لنزهای شیئی اضافه شده است. همچنین می توان آن را در اهداف آکرومات، اهداف آپوکرومات ترکیب کرد.
لنز شیئی ویژه: بر اساس عدسی شیئی فوق، عدسی شیئی برای دستیابی به اثر مشاهده ویژه طراحی و ساخته شده است.
چشمی
چشمی تصویر واقعی عدسی شیئی را بزرگنمایی می کند که بزرگنمایی تصویر میانی است و متعلق به بزرگنمایی دوم است. ساختار چشمی نسبتا ساده است و از چندین عدسی در چند گروه تشکیل شده است. نقطه ای که پرتوهای نوری که از چشمی عبور می کنند، نقطه چشمی نامیده می شود که بهترین موقعیت برای مشاهده تصویربرداری است.
چشمی دارای پیکربندی های متنوعی از بزرگنمایی است، 10X رایج ترین مورد استفاده است. 5X قابلیت کاهش تصویر بالاتری دارد، اما بزرگنمایی نسبتاً کم است. چشمی 20X بیشترین بزرگنمایی را دارد، اما وضوح تصویر کاهش می یابد. باید با توجه به نیازهای واقعی انتخاب شود.
کندانسور
کندانسور برای جبران کمبود نور، تغییر مناسب خواص نور منبع نور، تمرکز نمونه و بهبود روشنایی استفاده می شود. در زیر صحنه قرار دارد و هنگام استفاده از لنز شیئی NA بزرگتر یا مساوی 0.40 باید با آن همکاری کند. ساختارهای متنوعی دارد و دیافراگم های عددی مختلف لنز شیئی نیازهای متفاوتی برای کندانسور دارد.
1. کندانسور آبه (آبی خازن): خازن آبه از دو عدسی تشکیل شده است که توانایی جمع آوری نور بهتری دارد. وقتی NA عدسی شیئی میکروسکوپ معمولی بزرگتر یا مساوی 0.60 باشد، تصحیح انحراف رنگی و انحراف کروی کامل نیست و باید با هم استفاده شود.
2. کندانسور آپلاناتیک آکروماتیک: کندانسور آکروماتیک از یک سری عدسی تشکیل شده است که می تواند انحراف رنگی و انحراف کروی را تصحیح کند تا تصویربرداری رضایت بخشی به دست آید. این بهترین در رصد میدانی روشن است. مجهز به میکروسکوپ پیشرفته و لنز شیئی با بزرگنمایی کم است که قابل اجرا نیست.
3. کندانسورهای دیگر به کندانسورهایی اطلاق می شود که برای مقاصدی غیر از میدان روشن فوق الذکر استفاده می شوند، مانند کندانسورهای میدان تاریک، کندانسورهای کنتراست فاز، کندانسورهای پلاریزه کننده، کندانسورهای تداخل دیفرانسیل و غیره.
روش نورپردازی
روش های نورپردازی میکروسکوپ بر اساس موقعیت منبع نور و جهت پرتو به دو دسته نور ارسالی و اپی روشنایی تقسیم می شوند.
1. نور عبوری (روشنایی شفاف) نور عبوری برای نمونه های شفاف یا نیمه شفاف مناسب است و اکثر میکروسکوپ های بیولوژیکی متعلق به این نوع روشنایی هستند. در این میان دو شکل نورپردازی مرکزی و نورپردازی مایل وجود دارد.
(1) روشنایی مرکزی به این معنی است که محور مرکزی پرتو روشنایی و محور نوری میکروسکوپ در یک خط مستقیم قرار دارند که متداول ترین روش روشنایی انتقالی است. این روش به نور بحرانی و نورپردازی کوهلر تقسیم می شود.
1) روشنایی بحرانی، روش روشنایی عمومی. مزایا: پرتو منبع نور توسط کندانسور تصویربرداری می شود و بر روی نمونه تابش می شود و پرتو باریک و قوی است. عیوب: تصویر رشته ای منبع نور با صفحه نمونه منطبق است، روشنایی تصویر ناهموار است و بین روشنایی و تاریکی تفاوت وجود دارد. حذف: یک فیلتر رنگ جاذب حرارت سفید شیری را در مقابل منبع نور قرار دهید تا نور یکنواخت تر شود یا منبع نور LED را جایگزین کنید.
2) روشنایی کوهلر که به افتخار "تصویربرداری ثانویه" اختراع شده توسط مهندسان زایس نامگذاری شده است. بر کمبود روشنایی بحرانی غلبه می کند، دارای اثر تصویربرداری خوب و میکروگراف خوب است. ویژگی های اصلی عبارتند از: پس از عبور رشته منبع نور از کندانسور و دیافراگم میدان دید متغیر، تصویر رشته برای اولین بار روی صفحه دیافراگم کندانسور می افتد و کندانسور تصویر رشته دوم را تشکیل می دهد. در صفحه فوکوس پشتی وجود دارد. تمرکز حرارتی دیگر روی صفحه نمونه نیست و نمونه را می توان با روشنایی طولانی مدت مشاهده کرد.
(2) روشنایی مایل (روشنایی مایل)، محور مرکزی پرتو با محور نوری میکروسکوپ منطبق نیست و نمونه به طور مایل در یک زاویه مشخص روشن می شود. معمولاً در کنتراست فاز، میدان تاریک و میکروسکوپ های استریو استفاده می شود.
2. روشنایی حادثه: روشنایی حادثه را روشنایی بازتابی نیز می گویند. منبع نور بالای نمونه است و پرتو نور پس از عبور از عدسی شیئی بر روی نمونه می افتد. لنز شیئی به عنوان یک کندانسور عمل می کند و برای نمونه های غیر شفاف مناسب است. میکروسکوپ های فلورسانس، استریوسکوپی، معکوس و کانفوکال از این نور استفاده می کنند.
تنظیم محور نوری
در سیستم نوری میکروسکوپ، محور نوری منبع نور، عدسی خازنی، عدسی شیئی و چشمی و مرکز دیافراگم باید با محور نوری میکروسکوپ منطبق باشد و تنظیم محور نوری قبل از استفاده را نمی توان نادیده گرفت. .
1. تنظیم مرکز کندانسور تنظیم مرکز کندانسور کانون تنظیم محور نوری میکروسکوپ است. روش: ابتدا دیافراگم میدان را کاهش داده و با یک لنز شیئی 10× مشاهده کنید. اگر تصویر کانتور دیافراگم در مرکز نیست، دو پیچ در قسمت بیرونی کندانسور را تنظیم کنید تا آن را به مرکز تنظیم کنید. سپس به آرامی دیافراگم میدان را افزایش دهید تا زمانی که تصویر کانتور با مرکز در یک راستا قرار گیرد. لبه های میدان دید منطبق هستند و نشان می دهد که آنها از قبل کواکسیال هستند و بهتر است از یک کمی بزرگتر استفاده کنید.
2. تنظیم دیافراگم دیافراگم دیافراگم دیافراگم در کندانسور نصب می شود. روی لبه بیرونی کندانسور میکروسکوپ درجه تحقیقاتی علائم مقیاس وجود دارد که برای تنظیم کندانسور برای مطابقت با دیافراگم عددی عدسی شیئی مناسب است. هنگام تعویض لنز شیئی باید به طور همزمان تنظیم شود.
