روش شمارش مستقیم میکروسکوپ میکروبی
مراحل آزمایشی (روش شمارش مستقیم میکروسکوپ میکروبی)
1. رقیق سازی
سوسپانسیون مخمر دم را به طور مناسب رقیق کنید. اگر محلول باکتری غلیظ نباشد، رقیق کردن آن ضروری نیست.
2. اتاق معاینه و شمارش میکروسکوپی
قبل از افزودن نمونه ها، یک بررسی میکروسکوپی از محفظه شمارش تخته شمارش انجام دهید. اگر کثیفی وجود دارد، قبل از شمارش باید تمیز شود.
3. نمونه ها را اضافه کنید
صفحه شمارش سلول های خونی تمیز و خشک را با یک لیوان پوششی بپوشانید و سپس از یک قطره چکان دهان ریز استریل استفاده کنید تا یک قطره کوچک (نه خیلی زیاد) از محلول مخمر رقیق شده را از لبه شیشه بریزید. اجازه دهید محلول باکتری در امتداد شکاف با نفوذ مویرگی وارد محفظه شمارش شود. به طور کلی، محفظه شمارش را می توان با محلول باکتریایی پر کرد. مراقب باشید که حباب ایجاد نکنید.
4. شمارش میکروسکوپی
پس از 5 دقیقه استراحت، تخته شمارش سلول های خونی را روی صحنه میکروسکوپ قرار دهید، ابتدا با استفاده از میکروسکوپ کم قدرت محل اتاق شمارش را مشخص کنید و سپس برای شمارش به میکروسکوپ پرقدرت بروید. اگر قبل از شمارش محلول باکتری خیلی غلیظ یا خیلی نازک بود، قبل از شمارش باید رقت را دوباره تنظیم کرد. نیاز کلی رقت نمونه این است که تقریباً 5-10 بدن باکتری در هر سلول کوچک وجود داشته باشد. از هر اتاق شمارش 5 سلول (اختیاری 4 گوشه و سلول مرکزی) را برای شمارش انتخاب کنید. میسلیوم واقع در خط شبکه عموماً فقط روی خطوط بالا و راست حساب می شود. اگر مخمر جوانه بزند و اندازه جوانه به نصف سلول مادر برسد، دو شمارش باکتری انجام می شود. برای شمارش نمونه، محتوای باکتریایی نمونه باید بر اساس مقادیر به دست آمده از دو محفظه شمارش محاسبه شود.
5. تخته شمارش سلول های خونی را تمیز کنید
پس از استفاده، تخته شمارش سلول های خونی را با ستون آب روی شیر آب بشویید. برای شستن آن از اجسام سخت استفاده نکنید. پس از شستن، آن را با هوا خشک کنید یا با سشوار خشک کنید. با بررسی میکروسکوپی، مشاهده کنید که آیا اجسام باکتریایی باقی مانده یا رسوبات دیگری در هر سلول کوچک وجود دارد یا خیر. در صورت تمیز نبودن باید بارها شسته شود تا تمیز شود.
