روش ساخت اسلایدهای میکروسکوپی

روش ساخت اسلایدهای میکروسکوپی

سه روش برای ساخت لام میکروسکوپ وجود دارد:

1. روش اسمیر
روش اسمیر یک روش آماده سازی است که در آن مواد به طور یکنواخت روی لام پخش می شود.

مواد اسمیر شامل موجودات تک سلولی، جلبک‌های کوچک، خون، کشت‌های باکتریایی، بافت‌های سست گیاهان و حیوانات، لانه‌های اسپرم، بساک‌ها و غیره است.

هنگام لکه گیری باید توجه کرد:
(1) اسلاید باید تمیز باشد.

(2) سرسره باید صاف نگه داشته شود.

3) پوشش باید یکنواخت باشد. قطره مایع پوشش را در سمت راست مرکز لام بمالید و با تیغه چاقوی تشریح یا خلال دندان و غیره آن را به خوبی پخش کنید.

4) روکش باید نازک باشد. از یک لام دیگر به عنوان فشار دهنده استفاده کنید، به آرامی از راست به چپ در امتداد سطح لام با قطره محلول کاربردی فشار دهید (زاویه بین دو لام باید 30 درجه تا 45 درجه باشد) و یک لایه نازک یکنواخت اعمال کنید.

5) تثبیت در صورت نیاز به تثبیت، از فیکساتور شیمیایی یا تثبیت خشک کننده (باکتریایی) استفاده کنید.

6) رنگ آمیزی. از متیلن بلو برای باکتری ها و از لکه ریچل برای خون استفاده کنید. محلول رنگ آمیزی باید تمام سطح پوشش داده شده را بپوشاند.

7) آبکشی کنید. روی کاغذ جاذب جذب کنید یا خشک کنید.

8) فیلم را مهر و موم کنید. برای نگهداری طولانی مدت، از فیلم درخت کانادایی استفاده کنید.

2. روش پرس فیلم
روش فیلم فشار، ماده بیولوژیکی است که بین لام و ورق پوششی قرار می گیرد، با اعمال فشار معین، سلول های بافت به روش آماده سازی فشرده می شوند.

(1) مواد را بگیرید. مشاهده تقسیم سلولی، تقسیم سلولی باید سلول های بافتی شاداب و تازه به عنوان مواد انتخاب شود. مانند نوک ریشه، بافت مریستمی نوک ساقه، سلول های مغز استخوان، بساک (سلول های مادر گرده). لانه اسپرم (اسپرماتوگونیا) و غیره.

(2) تثبیت. تثبیت مواد را می توان با توجه به نیاز تعیین کرد، بلافاصله پس از مشاهده فیلم فشار مواد، نمی توان یک درمان ثابت جداگانه (و رنگ آمیزی همزمان) ایجاد کرد. مواد را بلافاصله پس از بازرسی نیست، می توان مواد را با یک فیکساتور (به طور کلی با ثابت کننده الکل استات) ثابت کرد. 2 تا 24 ساعت (بسته به جنس) پس از شستشو با اتانول 95 درصد، نگهداری شده در اتانول 70 درصد، آماده به کار ثابت شد.

(3) تفکیک. سلول ها به راحتی نمی توانند مواد را با محلول جداسازی هیدرولیز (مانند 1N HCl یا اسید هیدروکلریک یا محلول الکل) پراکنده کنند، درمان عمومی 6 تا 20 دقیقه، پس از تفکیک و شستشو با آب قبل از رنگ آمیزی.

(4) رنگ آمیزی. انواع مختلفی از لکه ها وجود دارد. مشاهده کروموزوم ها معمولاً برای رنگ آمیزی با محلول رنگ آمیزی استات سرخابی استفاده می شود.

(5) پرس فیلم. مواد را روی یک لام قرار دهید، یک قطره آب یا محلول رنگ‌آمیزی به آن اضافه کنید، روکش را بپوشانید و به آرامی لام را با انگشت شست خود فشار دهید.

(6) مشاهده. پس از فشار دادن فیلم، می توان آن را در زیر میکروسکوپ مشاهده کرد.