مقدمه ای بر مزایا و معایب میکروسکوپ اسکن لیزری چند فوتونی
1. با استفاده از نور قرمز یا نور مادون قرمز برای تحریک، پراکندگی نور کم است و پراکندگی ذرات کوچک با توان چهارم طول موج نسبت معکوس دارد.
2. فوتون های پراکنده بیشتری از سطح مقطع تصویربرداری را می توان بدون نیاز به سوراخ سوزنی جمع آوری کرد.
3. سوراخ سوراخ نمی تواند فوتون های پراکنده منتشر شده از ناحیه فوکوس یا ناحیه فوکوس را تشخیص دهد و نسبت سیگنال به نویز تصویربرداری چند فوتونی در لایه های عمیق خوب است.
4. نور فرابنفش یا مرئی که برای تحریک تک فوتون استفاده می شود، قبل از اینکه پرتو به صفحه کانونی برسد، به راحتی جذب و توسط نمونه ضعیف می شود و تحریک لایه های عمیق دشوار است.
5. از نظر مشاهده میکروسکوپ بیولوژیکی، اولین ملاحظات آسیب نرساندن به حالت فعال خود ارگانیسم و حفظ جریان آب، غلظت یون، اکسیژن و مواد مغذی است. در مورد مشاهده نور، گرما و انرژی فوتون باید در مقدار تابش و انرژی نور باقی بمانند تا سلول ها آسیب نبینند.
6. میکروسکوپ چند فوتونی مزایای زیادی دارد. مانند وضوح سه بعدی، نفوذ عمق، راندمان پراکندگی، نور پس زمینه، نسبت سیگنال به نویز، کنترل و ... همگی دارای ویژگی هایی هستند که میکروسکوپ های لیزری قبلی آن را نداشتند یا نمی توانستند با آن مقایسه کنند.
معایب میکروسکوپ اسکن لیزری چند فوتونی:
1. فقط می تواند فلورسانس را تصویر کند.
2. اگر نمونه حاوی کروموفورهایی باشد که نور تحریک را جذب می کنند، ممکن است نمونه از نظر حرارتی آسیب ببیند.
3. وضوح کمی کاهش یافته است. اگرچه می توان آن را با استفاده از سوراخ های کانفوکال به طور همزمان بهبود بخشید، سیگنال از دست می رود.
4. محدود به لیزرهای فوق سریع گران قیمت، هزینه میکروسکوپ های اسکن چند فوتونی نسبتاً زیاد است.
