مقدمه ای بر میکروسکوپ اسکن لیزری چند فوتونی: مزایا و معایب
1. برانگیختگی نور قرمز یا مادون قرمز، پراکندگی نور کم است و پراکندگی ذرات کوچک با توان چهارم طول موج نسبت عکس دارد.
2. فوتون های پراکنده بیشتری از سطح مقطع تصویربرداری را می توان بدون نیاز به سوراخ سوزنی جمع آوری کرد.
3. سوراخ‌ها نمی‌توانند فوتون‌های پراکنده ساطع شده از نواحی فوکوس یا کانونی را تشخیص دهند و مولتی فوتون‌ها نسبت سیگنال به نویز بهتری در تصویربرداری عمیق دارند.
4. نور فرابنفش یا مرئی که برای تحریک تک فوتون استفاده می شود، قبل از اینکه پرتو به صفحه کانونی برسد، به راحتی جذب و توسط نمونه ضعیف می شود و تحریک لایه های عمیق را دشوار می کند.
5. از نظر مشاهده میکروسکوپی بیولوژیکی، اولین نکته این است که به حالت فعال خود ارگانیسم آسیب نرسانید، گردش آب، غلظت یون، اکسیژن و مواد مغذی را حفظ کنید. در زمینه مشاهده نور، هم انرژی حرارتی و هم انرژی فوتون باید در دوز تابش و انرژی نوری باقی بماند که به سلول ها آسیب نرساند.
6. میکروسکوپ چند فوتونی مزایای زیادی دارد. از نظر وضوح سه بعدی، تهاجم به عمق، راندمان پراکندگی، نور پس زمینه، نسبت سیگنال به نویز، کنترل و غیره، ویژگی هایی وجود دارد که میکروسکوپ های لیزری قبلی فاقد آن هستند یا نمی توانند از آنها پیشی بگیرند.
معایب میکروسکوپ اسکن لیزری چند فوتونی:
1. فقط برای تصویربرداری فلورسانس.
2. اگر نمونه شامل کروموفورهایی باشد که می توانند نور تحریک را جذب کنند، نمونه ممکن است در معرض آسیب حرارتی قرار گیرد.
3. وضوح کمی کاهش می یابد، اگرچه می توان آن را با استفاده همزمان از سوراخ های کوچک confocal بهبود بخشید، سیگنال از دست می رود.
4. با توجه به محدودیت های لیزرهای فوق سریع گران قیمت، هزینه میکروسکوپ های اسکن چند فوتونی نسبتاً بالا است.
