مزایای بهبود یافته میکروسکوپ چند فوتونی اسکن لیزری

مزایای بهبود یافته میکروسکوپ چند فوتونی اسکن لیزری

میکروسکوپ مولتی فوتونی اسکن لیزری یک پیشرفت مهم در میکروسکوپ نوری است که عمدتاً نشان می‌دهد که می‌تواند ساختار عمیق سلول‌های زنده، سلول‌ها و بافت‌های ثابت را مشاهده کند و می‌تواند ساختار صفحه چند لایه Z شفاف و واضح، یعنی برش‌های نوری را به دست آورد. ، که می توان از آن برای ساخت ساختار جامد سه بعدی نمونه ها استفاده کرد. میکروسکوپ کانفوکال از منبع نور لیزری استفاده می کند که پس از انبساط، کل صفحه کانونی پشتی عدسی شیئی را پر می کند و سپس از سیستم عدسی عدسی شیئی عبور می کند تا به نقاط بسیار کوچکی در صفحه کانونی نمونه همگرا شود. با توجه به دیافراگم عددی عدسی شیئی، قطر پرنورترین نقطه روشنایی حدود 0}.25 ~ 0.8μm و عمق آن در حدود 0}.5~1.5μm است. .. اندازه تمرکز کوپلیمریزاسیون به طراحی میکروسکوپ، طول موج لیزر، ویژگی های عدسی شیئی، تنظیم حالت واحد اسکن و ویژگی های نمونه بستگی دارد. محدوده روشنایی و عمق میدان بسیار زیاد است، در حالی که نور میکروسکوپ کانفوکال روی یک تمرکز * * روی صفحه کانونی متمرکز است. اساسی‌ترین مزیت میکروسکوپ کانفوکال این است که می‌تواند برش‌های نوری ظریفی از نمونه‌های فلورسنت ضخیم بسازد (که می‌تواند به ۵0 میکرومتر یا بیشتر برسد)، و ضخامت برش‌ها حدود ۰.۵ تا ۱.۵ میکرومتر است. با حرکت دادن نمونه به بالا و پایین توسط موتور پله محور Z میکروسکوپ می توان یک سری تصاویر برش نوری به دست آورد. اکتساب اطلاعات تصویر در صفحه اول کنترل می شود و سیگنال هایی از موقعیت های دیگر روی نمونه مختل نمی شوند. پس از حذف تأثیر فلورسانس پس زمینه و افزایش نسبت سیگنال به نویز، کنتراست و وضوح تصویر هم کانونی در مقایسه با تصویر فلورسانس سنتی روشنایی میدان به وضوح بهبود یافته است. در بسیاری از نمونه‌ها، بسیاری از اجزای ساختاری پیچیده برای تشکیل یک سیستم پیچیده در هم تنیده شده‌اند، اما زمانی که بتوان بخش‌های نوری کافی را جمع‌آوری کرد، می‌توانیم آن‌ها را به‌صورت سه بعدی توسط نرم‌افزار بازسازی کنیم. این روش تجربی به طور گسترده در تحقیقات بیولوژیکی برای روشن شدن رابطه پیچیده ساختاری و عملکردی بین سلول ها یا بافت ها استفاده شده است.