روشهای تصویربرداری از میدان روشن-و میدان تاریک-در میکروسکوپ فلورسانس
(1) روش تصویربرداری میدان روشن (BFI)، که فقط به پرتو الکترونی ارسالی در ناحیه پاراکسیال اجازه میدهد از دیافراگم شیئی عبور کند و تصویری تاریک را در پسزمینهای روشن تشکیل دهد. هرچه دیافراگم دیافراگم شیئی کوچکتر باشد، کنتراست تصویر میدان روشن بیشتر است. (2) تصویربرداری میدان تاریک (DFI) تکنیکی است که به تنها بخشی از پرتو پراکنده با زاویه بزرگ یا یک پرتو پراش خاصی از کریستال اجازه میدهد از دیافراگم شیئی عبور کند، در حالی که پرتو ارسالی را مسدود میکند. این یک تصویر گرافیکی روشن را در پس زمینه تیره تشکیل می دهد. این روش تصویربرداری میدان تاریک می تواند کنتراست تصاویر را بهبود بخشد و یک تکنیک تصویربرداری مهم است.
تقریباً چهار روش برای دستیابی به تصاویر میدان تاریک با استفاده از میکروسکوپهای فلورسانس لایکا وجود دارد: (1) حفظ نور عمودی در امتداد محور نوری در حالی که دیافراگم شیئی را حرکت میدهد. (2) استفاده از نور مایل برای گرفتن پرتوهای پراکنده در جهت محور نوری، تصویربرداری میدان تاریک مرکزی (CDFI) نامیده می شود. (3) دیافراگم شیئی با توقف پرتو مرکزی و ناحیه شفاف دایره ای. (4) از یک لنز خازنی شفاف دایره ای برای سنجش نور و یک دیافراگم دایره ای مرکزی برای عدسی شیئی استفاده کنید. روش * در اینجا ساده ترین است، اما از تصویربرداری الکترونیکی در ناحیه آستین دیستال استفاده می کند، بنابراین انحراف زیاد است و کیفیت تصویر خیلی خوب نیست. روش دوم میتواند از ایرادات فوق جلوگیری کند، اما دیافراگم شیئی میکروسکوپ فلورسانس لایکا فقط بخش کوچکی از الکترونهای پراکنده پراکنده را دریافت میکند و در نتیجه بازده کمتری دارد. طرف دیافراگم اغلب در معرض مقدار زیادی بمباران الکترونی قرار می گیرد که به راحتی می تواند باعث آلودگی نامتقارن شده و کیفیت تصویر را تحت تأثیر قرار دهد. عدسی حلقوی از این جنبه بهبود یافته است، اما نقطه ضعف آن این است که تولید آن دشوار است و رسیدن به تقارن محوری کامل دشوار است. با توجه به نیازهای نسبتاً آرام برای سیستم روشنایی، راه حل دوم را می توان اتخاذ کرد، که شامل افزودن یک روزنه حلقوی در کندانسور برای تامین نور پرتو توخالی برای نمونه است. اثر این دستگاه. وضوح تصویر آن می تواند نزدیک به تصاویر میدان روشن باشد، در حالی که کنتراست تا حد زیادی بهبود یافته است.
