نحوه تهیه نمونه های میکروسکوپ الکترونی
روش های اصلی آماده سازی برای نمونه های مشاهده ای برای میکروسکوپ الکترونی عبوری عبارتند از:
1. روش فرافکنی
در شرایط خلاء، از اتم های فلزات سنگین با قابلیت پراکندگی الکترون قوی برای پاشش سطح نمونه استفاده می شود. این یک کنتراست قوی بین نمونه و ناحیه اسپری نشده ایجاد می کند و قسمت اسپری نشده به صورت طرح ریزی نمونه می شود. با توجه به طرح ریزی، می توان شکل سه بعدی و ارتفاع نمونه را درک کرد. این روش معمولا برای مشاهده تاژک های باکتریایی یا ذرات ویروس استفاده می شود.
2. روش رنگ آمیزی منفی
از آنجایی که این روش برای برجسته کردن نمونه، پس زمینه نمونه را رنگ آمیزی می کند، به آن رنگ آمیزی منفی می گویند. به طور کلی، نمونه توسط موادی با چگالی الکترونی بالا احاطه شده است که هیچ ساختاری از خود نشان نمی دهند و با نمونه واکنش نمی دهند، مانند نمک سدیم اسید فسفو تنگستیک. در همان زمان، رنگ نیز در داخل جسم مشاهده قرار می گیرد. به این ترتیب، نه تنها می تواند شکل را نمایش دهد، همچنین می تواند ساختار داخلی نمونه را تا حدی منعکس کند. با استفاده از این روش می توان سلول های باکتریایی، ویروس ها و ... را مشاهده کرد.
3. روش برش فوق نازک
این متداول ترین روش مورد استفاده است زیرا امکان مشاهده ساختارهای ظریف داخل سلول ها یا سایر نمونه ها را فراهم می کند. معمولاً نمونه باید طبق یک روش خاص ثابت و آبگیری شود، سپس به عنوان تکیه گاه در رزین قرار داده شود و با استفاده از اولترامیکروتوم به برش های بسیار نازک بریده شود. از آنجایی که تنها برش هایی با ضخامت 20 تا 100 نانومتر را می توان با میکروسکوپ الکترونی عبوری مشاهده کرد، در نمونه های کلی باکتریایی، یک سلول باید به 10 تا 50 قطعه تقسیم شود.
هنگام انتخاب یک میکروسکوپ الکترونی، ابتدا بررسی کنید که آیا سازنده میکروسکوپ الکترونی روبشی دارای گواهینامه کامل است یا خیر. در مرحله دوم، قرارداد سازنده میکروسکوپ الکترونی روبشی را بررسی کنید. ثالثاً، خدمات سازنده میکروسکوپ الکترونی روبشی را درک کنید. و ثالثاً پارامترهای فنی میکروسکوپ الکترونی روبشی را بررسی کنید.
علاوه بر انتخاب سازنده میکروسکوپ الکترونی روبشی، هنگام خرید میکروسکوپ الکترونی روبشی مربوطه، باید عملکرد و شاخص های فنی میکروسکوپ الکترونی روبشی را نیز در نظر بگیرید. این که آیا می تواند نیازهای تحلیل روزانه ما را برآورده کند، باید عوامل مختلفی را هنگام خرید در نظر بگیرید. پارامترهای فنی، به طوری که نیازهای تست و تجزیه و تحلیل ما را برآورده کند.
