میکروسکوپ های فلورسانس را می توان با توجه به اصل مسیر نور به دو نوع تقسیم کرد:
1. میکروسکوپ فلورسانس انتقالی
در میکروسکوپهای فلورسانس قدیمیتر، منبع نور تحریک از ماده نمونه از یک کندانسور عبور میکند تا فلورسانس را تحریک کند. مزیت این است که فلورسانس در بزرگنمایی کم قوی است، اما نقطه ضعف آن این است که با افزایش بزرگنمایی، فلورسانس ضعیف می شود. بنابراین فقط برای مشاهده مواد نمونه بزرگتر مناسب است.
2. میکروسکوپ اپی فلورسانس
نور تحریک از عدسی شیئی به سمت پایین بر روی سطح نمونه می افتد، به عنوان مثال، همان عدسی شیئی به عنوان کندانسور روشنایی و عدسی شیئی برای جمع آوری فلورسانس استفاده می شود.
یک تقسیم کننده پرتو دو رنگ (آینه دو رنگ) باید به مسیر نوری اضافه شود که با محور نوری زاویه 45 درجه دارد. نور تحریک به عدسی شیئی منعکس شده و روی نمونه متمرکز می شود. فلورسانس تولید شده توسط نمونه توسط سطح عدسی شیئی و پوشش منعکس می شود. نور تحریک منعکس شده بر روی سطح لام شیشه ای همزمان وارد عدسی شیئی می شود و برای جداسازی نور تحریک و فلورسانس به جداکننده پرتو دو رنگی باز می گردد. سپس نور تحریک باقیمانده توسط فیلتر مسدود کننده جذب می شود. اگر از درج های ترکیبی فیلتر تحریک / تقسیم کننده پرتو دو رنگ / فیلتر مسدود کننده مختلف استفاده می کنید، می توانید نیازهای محصولات مختلف واکنش فلورسانس را برآورده کنید.
مزیت این نوع میکروسکوپ فلورسانس این است که میدان دید به طور یکنواخت روشن می شود، تصویر واضح است و هر چه بزرگنمایی بیشتر باشد، فلورسانس قوی تر است.
دسته های اصلی میکروسکوپ های نوری کدامند؟
1. میکروسکوپ نوری معمولی
میکروسکوپهای نوری معمولی عمدتاً از بخشهای زیر تشکیل شدهاند: سیستم روشنایی که شامل منبع نور و کندانسور میشود. سیستم بزرگنمایی نوری که از عدسی شیئی و چشمی تشکیل شده است. این مهمترین بخش میکروسکوپ است و برای جلوگیری از انحراف کروی بیش از حد و انحراف رنگی، هر دو عدسی چشمی و شیئی از گروههای عدسی پیچیده تشکیل شدهاند.
2. میکروسکوپ اسکن کانفوکال لیزری
میکروسکوپ اسکن کانفوکال لیزری بسیار پیشرفته و پیچیده به نظر می رسد. در واقع، به سادگی از لیزر به عنوان منبع نور اسکن برای اسکن و تصویربرداری سریع اشیاء نقطه به نقطه، خط به خط و سطح به سطح استفاده می کند.
بر اساس طول موج کوتاهتر پرتو لیزر، خود پرتو بسیار نازک است، که مشخص میکند که میکروسکوپ اسکن لیزری کانفوکال وضوح بالایی دارد که تقریباً سه برابر میکروسکوپ نوری معمولی است. این نوع میکروسکوپ برای مشاهده مورفولوژی سلولی و تجزیه و تحلیل کمی اجزای بیوشیمیایی داخل سلولی و اندازه گیری مورفولوژی سلولی استفاده می شود.
3. میکروسکوپ میدان تاریک
یک صفحه نور در مرکز کندانسور یک میکروسکوپ میدان تاریک وجود دارد که از ورود مستقیم نور به عدسی شیئی جلوگیری می کند. فقط نور منعکس شده و پراش شده توسط نمونه می تواند وارد عدسی شیئی شود. بنابراین زمینه میدان دید سیاه و لبه های اجسام روشن است.
