روش تجربی برای روش شمارش میکروسکوپ میکروبیولوژیکی مستقیم
1. رقیق سازی
سوسپانسیون ساکارومایسس سرویزیه برای رقت مناسب، مایع باکتریایی، مانند غلیظ نیست، نمی تواند رقیق شود.
2. بازرسی آینه ای اتاق شمارش
قبل از افزودن نمونه ها، ابتدا باید محفظه شمارش صفحه شمارش بررسی شود. اگر کثیفی وجود دارد، قبل از شمارش باید تمیز شود.
3. نمونه اضافه
صفحه هماتوکریت تمیز و خشک که با یک لپه پوششی پوشانده شده است، و سپس بورت دهان ریز آسپتیک، مایع مخمر آبجو را از لبه قطرات پوششی رقیق می کنند (نباید زیاد باشد)، به طوری که مایع باکتریایی در امتداد شکاف با نفوذ مویرگی به داخل محفظه شمارش، محفظه شمارش عمومی را می توان با مایع باکتریایی پر کرد. توجه داشته باشید که نباید حباب هوا وجود داشته باشد.
4. شمارش میکروسکوپی
پس از 5 دقیقه استراحت، صفحه شمارش خون را روی مرحله حامل میکروسکوپ قرار دهید، ابتدا محل محفظه شمارش را با بزرگنمایی کم پیدا کنید و سپس برای شمارش به بزرگنمایی زیاد تغییر دهید. اگر قبل از شمارش مایع باکتری بیش از حد غلیظ یا نازک تشخیص داده شود، قبل از شمارش باید رقت را مجدداً تنظیم کرد. به طور کلی، رقت نمونه به حدود 5-10 موجود در هر سلول کوچک نیاز دارد. برای هر محفظه شمارش، موجودات موجود در 5 محفظه میانی (4 گوشه و مرکز محفظه میانی را می توان انتخاب کرد) شمارش می شود. باکتری های واقع در خطوط شبکه به طور کلی فقط در خطوط بالا و سمت راست شمارش می شوند. در مورد جوانه زدن مخمر، اگر جثه جوانه زده نصف اندازه سلول مادر باشد، دو موجود زنده شمارش می شود. شمارش یک نمونه از دو محفظه شمارش برای شمارش مقدار برای محاسبه محتوای باکتریایی نمونه.
5. تمیز کردن صفحه هماتوکریت
پس از استفاده، صفحه شمارش سلول های خون در قفس آب را با ستون آب شستشو دهید، از اجسام سخت برای شستن و مسواک زدن استفاده نکنید، شستشو و خشک کنید یا با سشوار خشک کنید. صفحه را به صورت میکروسکوپی بررسی کنید و مشاهده کنید که آیا موجودات باقیمانده یا رسوبات دیگری در هر محفظه کوچک وجود دارد یا خیر. در صورت تمیز نبودن باید شستشو را تکرار کرد تا تمیز شود.
