اصول تجربی روش شمارش مستقیم میکروسکوپ میکروبی
شمارش مستقیم زیر میکروسکوپ با استفاده از هموسیتومتر یک روش رایج برای شمارش میکروارگانیسم ها است. مزیت این روش این است که بصری و سریع است. سوسپانسیون باکتریایی رقیق شده مناسب (یا سوسپانسیون اسپور) را در محفظه شمارش بین لام و پوشش هموسیتومتر قرار دهید و زیر میکروسکوپ بشمارید. از آنجایی که حجم محفظه شمارش ثابت است ({0}}.1 میلیمتر مربع)، میتوان آن را بر اساس تعداد میکروارگانیسمهای مشاهده شده در زیر میکروسکوپ به تعداد کل میکروارگانیسمها در واحد حجم تبدیل کرد. از آنجایی که این روش تعداد کل باکتری های زنده و مرده را شمارش می کند، به آن روش شمارش کل باکتری ها نیز می گویند.
هموسیتومتر معمولاً یک اسلاید ویژه با چهار شیار است که سه سکو را تشکیل می دهد. سکوی میانی توسط یک شیار افقی کوتاه به دو نیمه تقسیم می شود. در هر طرف یک شبکه مربعی بر روی سکو حک شده است. هر شبکه مربع به 9 مربع بزرگ تقسیم می شود. مربع بزرگ در وسط اتاق شمارش است. شمارش میکروارگانیسم ها در محفظه شمارش انجام می شود. ساختار هموسیتومتر در شکل Ⅷ-1 نشان داده شده است.
مقیاس محفظه شمارش به طور کلی دارای دو مشخصات است. یکی یک مربع بزرگ است که به 16 مربع متوسط تقسیم می شود، و هر مربع متوسط به 25 مربع کوچک تقسیم می شود (شکل Ⅷ-2). دیگری یک مربع بزرگ است. شبکه مربع به 25 مربع متوسط و هر مربع متوسط به 16 مربع کوچک تقسیم می شود (شکل VIII-1، C). اما مهم نیست که چه نوع تخته شماری باشد، تعداد مربع های کوچک در هر مربع بزرگ یکسان است، یعنی 16×25=400 مربع کوچک، همانطور که در شکل Ⅷ-2 نشان داده شده است.
طول ضلع هر مربع بزرگ 1 میلی متر است، بنابراین مساحت هر مربع بزرگ 1 میلی متر مربع است. پس از پوشاندن شیشه روکش، ارتفاع بین اسلاید و شیشه روکش 0.1 میلی متر است، بنابراین حجم محفظه شمارش 0}.1 میلی متر مکعب است.
هنگام شمارش، معمولاً تعداد کل باکتری ها را در پنج مربع متوسط بشمارید، سپس مقدار میانگین هر مربع وسط را پیدا کنید و سپس در 16 یا 25 ضرب کنید تا تعداد کل باکتری ها در یک مربع بزرگ به دست آید و سپس تبدیل به عدد را محاسبه کنید. تعداد کل باکتری ها در 1 میلی لیتر محلول باکتریایی.
