گسترش مزایای میکروسکوپ اسکن لیزر Multiphoton برای شامل
میکروسکوپ اسکن لیزر ، میکروسکوپ مولتی هوتون بهبود قابل توجهی در میکروسکوپ نوری است ، که عمدتاً در توانایی مشاهده ساختارهای عمیق سلولهای زنده ، سلولهای ثابت و بافتها و به دست آوردن ساختارهای چند لایه Z-هواپیمای روشن و تیز ، یعنی برش های نوری آشکار می شود ، که می تواند برای ساخت ساختارهای جامد سه بعدی از نمونه ها استفاده شود. میکروسکوپ کانفوکال از منبع نور لیزر استفاده می کند ، که برای پر کردن کل صفحه کانونی لنزهای هدف گسترش یافته و سپس در نقاط بسیار کوچک در صفحه کانونی نمونه از طریق سیستم لنز لنز هدف همگرا می شود. با توجه به دیافراگم عددی لنزهای هدف ، قطر نقطه روشنایی روشن در مورد 0 است. 25-0 8 میکرومتر ، و عمق در مورد 0. {{7} 5 5 μ mm. اندازه نقطه کانفوکال با طراحی میکروسکوپ ، طول موج لیزر ، خصوصیات عینی ، تنظیمات حالت واحد اسکن و خصوصیات نمونه تعیین می شود. دامنه و عمق نورپردازی یک میکروسکوپ میدانی بزرگ است ، در حالی که روشنایی میکروسکوپ کانفوکال روی یک نقطه کانونی در صفحه کانونی متمرکز است. مزیت اساسی میکروسکوپ کانفوکال این است که می تواند بخش نوری ریز را روی نمونه های ضخیم فلورسنت (حداکثر 5 {10}} μ m یا بیشتر) انجام دهد ، با ضخامت تقریبا 0.5 تا 1.5 میکرومتر. سری تصاویر برش نوری را می توان با حرکت دادن نمونه به سمت بالا و پایین با استفاده از موتور پله ای محور z از میکروسکوپ بدست آورد. جمع آوری اطلاعات تصویر در صفحه * * کنترل می شود ، بدون تداخل از سیگنال های ساطع شده از سایر موقعیت های موجود در نمونه. پس از از بین بردن تأثیر فلورسانس پس زمینه و افزایش نسبت سیگنال به نویز ، کنتراست و وضوح تصاویر کانفوکال در مقایسه با تصاویر فلورسانس روشنایی سنتی به طور قابل توجهی بهبود می یابد. در بسیاری از نمونه ها ، مؤلفه های ساختاری پیچیده برای ایجاد سیستم های پیچیده در هم می آمیزند ، اما پس از جمع آوری بخش های نوری کافی ، می توانیم از نرم افزار برای بازسازی آنها در سه بعد استفاده کنیم. این روش تجربی به طور گسترده ای در تحقیقات بیولوژیکی برای روشن شدن روابط پیچیده ساختاری و عملکردی بین سلول ها یا بافت ها مورد استفاده قرار گرفته است.
