مراحل انتخاب و روش های پروب های فلورسنت برای میکروسکوپ کانفوکال را با جزئیات شرح دهید
در آزمایش‌هایی با میکروسکوپ‌های کانفوکال، برخی از شاخص‌های تجربی را می‌توان با استفاده از خود فلورسانس خود نمونه یا مواد برون‌زا تشخیص داد، اما بیشتر موادی که باید آزمایش شوند فلورسانس قابل اندازه‌گیری ندارند و باید با پروب‌های فلورسنت برچسب‌گذاری شوند. دارای سیگنال فلورسنت قابل اندازه گیری است. بنابراین، چگونه می توان پروب های فلورسنت را برای میکروسکوپ کانفوکال انتخاب کرد؟
1. با توجه به هدف آزمایش، شاخص هایی را که باید آزمایش شوند، تعیین کنید
پس از تعیین شاخص تشخیص، محدوده انتخاب پروب های فلورسنت نیز تعیین می شود. مشاهده می شود که انتخاب اینکه کدام پروب فلورسنت در آزمایش استفاده شود با هدف آزمایش تعیین می شود. به عنوان مثال، اگر هدف آزمایش بررسی تغییرات یون های کلسیم در کاردیومیوسیت ها در هنگام وقوع فیبریلاسیون دهلیزی باشد، می توان تعیین کرد که ماده مورد آزمایش یون های کلسیم در کاردیومیوسیت ها است و محدوده انتخاب پروب های فلورسنت محدود به پروب های یون کلسیم که می توانند سلول های زنده را برچسب گذاری کنند. سوزن.
2. محدوده پروب های فلورسنت موجود را تعیین کنید
برای مواد یا شاخص‌های آزمایشی جدید، اگر هدف آزمایش کاوش پروب‌های فلورسنت جدید نیست، می‌توانید از پروب‌های بالغ و روش‌های برچسب‌گذاری استفاده کنید. نوع یا محدوده کاوشگرهای فلورسنت که می توانند ماده مورد آزمایش را برچسب گذاری کنند را می توان با جستجو در ادبیات معتبر یا کاتالوگ محصولات شرکت های معرف معروف در داخل و خارج از کشور تعیین کرد.
3. بررسی کنید که آیا ویژگی های پروب فلورسنت الزامات آماده سازی نمونه های فلورسنت را برآورده می کند یا خیر.
ویژگی های پروب های فلورسنت به طور مستقیم بر برچسب گذاری نمونه ها و نتایج تجربی تأثیر می گذارد. بنابراین، قبل از انتخاب پروب های فلورسنت و برچسب زدن نمونه ها در آزمایش، لازم است ویژگی های فلورسانس آنها را به طور کامل درک کنید. ویژگی های پروب های فلورسنت که باید بررسی شوند عبارتند از:
1. ویژگی های واکنش پروب ها و نمونه های نور
2. حساسیت و شدت فلورسانس پروب های فلورسنت
3. خواص طیفی نمونه های برچسب گذاری شده با پروب های فلورسنت
4. پایداری فلورسانس
5. برهمکنش بین فلورسانس چندگانه در نمونه
