1. منابع روشنایی مختلف
منبع نور مورد استفاده در میکروسکوپ جریان الکترونی است که توسط تفنگ الکترونی ساطع می شود و منبع روشنایی میکروسکوپ نوری نور مرئی (نور خورشید یا نور) است. از آنجایی که طول موج جریان فرعی بسیار کوتاهتر از طول موج موج نور است، بزرگنمایی و وضوح میکروسکوپ الکترونی به طور قابل توجهی بیشتر از آینه نور است. .
2. لنزهای مختلف
عدسی شیئی که در میکروسکوپ الکترونی بزرگنمایی میکند عدسی الکترومغناطیسی است (یک سیم پیچ الکترومغناطیسی حلقهای شکل که میتواند میدان مغناطیسی در مرکز ایجاد کند) و عدسی شیئی میکروسکوپ نوری عدسی نوری ساخته شده از شیشه است. سه گروه از عدسی های الکترومغناطیسی در میکروسکوپ های الکترونی وجود دارد که معادل عملکرد شی کندانسور و چشمی در میکروسکوپ های نوری است.
3. اصول مختلف تصویربرداری
در میکروسکوپ الکترونی، پرتو الکترونی که بر روی نمونه مورد بررسی قرار میگیرد، توسط یک عدسی الکترومغناطیسی بزرگنمایی میشود و سپس برای تصویربرداری به صفحه فلورسنت برخورد میکند یا برای تصویربرداری بر روی یک فیلم حساس به نور عمل میکند. مکانیسم تفاوت در چگالی الکترون به این صورت است که وقتی پرتو الکترونی روی نمونه مورد آزمایش قرار میگیرد، الکترونهای فرودی با اتمهای ماده برخورد میکنند تا پراکندگی ایجاد کنند و قسمتهای مختلف نمونه درجات پراکندگی متفاوتی برای الکترونها دارند. بنابراین تصویر الکترونی نمونه در سایه ارائه می شود. تصویر جسم نمونه در میکروسکوپ نوری با تفاوت روشنایی ارائه می شود که ناشی از تفاوت در مقدار نور جذب شده توسط ساختارهای مختلف نمونه است.
4. قطعنامه
به دلیل تداخل و پراش نور، وضوح میکروسکوپهای نوری را فقط میتوان به 02-05ام محدود کرد. از آنجایی که میکروسکوپ های الکترونی از پرتوهای الکترونی به عنوان منبع نور استفاده می کنند، نرخ شکست می تواند بین 1 تا 3 نانومتر باشد. بنابراین مشاهده بافتی میکروسکوپ های نوری متعلق به آنالیز سطح میکرونی و مشاهده بافتی میکروسکوپ های الکترونی به آنالیز سطح نانو تعلق دارد.
5. عمق میدان
به طور کلی، عمق میدان یک میکروسکوپ نوری بین 2-3امم است، بنابراین صافی سطح نمونه بسیار سخت است، بنابراین فرآیند آمادهسازی نمونه نسبتاً پیچیده است. روح SEM می تواند به چند متر هم برسد، بنابراین نیازی به صاف بودن هندسه سطح نمونه وجود ندارد، آماده سازی نمونه نسبتاً ساده است و برخی از هندسه های نمونه نیازی به آماده سازی نمونه ندارند. میکروسکوپهای استریو دارای عمق میدان نسبتاً زیادی هستند، اما وضوح آنها بسیار پایین است.
6. روش های مختلف آماده سازی نمونه استفاده می شود
روش آماده سازی نمونه های بافت و سلول مورد استفاده برای مشاهده زیر میکروسکوپی پیچیده است، با دشواری فنی و هزینه بالا. معرف ها و عملیات ویژه در مراحل نمونه برداری، تثبیت، آبگیری و جاسازی مورد نیاز است. در نهایت، بلوک های بافت جاسازی شده باید آن را در یک اولترامیکروتوم قرار دهید تا به نمونه های بسیار نازک با ضخامت 50 تا 100 نانومتر برش دهید. نمونه های مشاهده شده توسط میکروسکوپ نوری عموماً روی لام های شیشه ای قرار می گیرند، مانند نمونه های برش بافت معمولی، نمونه های اسمیر سلولی، نمونه های فشرده شده با بافت و نمونه های قطره سلولی.
7. بزرگنمایی
بزرگنمایی موثر میکروسکوپ نوری 1000X است. بزرگنمایی موثر یک میکروسکوپ الکتریکی خوب می تواند به 1000000X برسد.
